增殖培养:培养60天后,将小于0.5厘米的不定芽直接转接,大于0.5厘米新芽(梢)切割成0.5~1厘米左右的茎段转接,每瓶接种15个,接种50瓶,重复3次。培养60天观察增殖情况。
生根培养:将培养60天左右的试管苗3厘米以上的嫩茎切下,接入基本培养基为1/2MS的不同激素及不同pH值的培养基中,进行生根培养。诱导生根培养基中添加2%的蔗糖、0.7%的琼脂和0.2g/L活性炭。培养温度(252)℃,光照时间为12h/d(下同),光强1500~2000lx。每瓶接种10株嫩茎,接种5瓶,重复3次。培养60天后,统计生根率。
试验观察到,南天竹在组培过程中内生菌大体有两种表现形式:其一为接种20天左右培养基表面出现乳白色分布不均的小白点,然后逐渐干缩,与常见的细菌污染(脓状)或真菌污染(菌丝)状表现不同,并且不影响植株生长,仍能分割继代培养;其二为培养基内部接种茎段基部出现呈白色丝状或片状污染,随培养时间延长蔓延至培养基表面,基本不影响植株生长,但不能用于分割继代培养。