

液相色谱流动相脱气:为何必不可少?广州中森检测案例解析
在高效液相色谱(HPLC)分析中,看似简单的流动相脱气步骤,实则是保障数据精准可靠的关键防线。流动相中溶解的气体(主要是空气里的氧气和氮气),在高压泵送和色谱柱温控过程中极易析出形成微小气泡,引发一系列严重干扰:
* 泵系统紊乱: 气泡进入高压泵,导致压力剧烈波动甚至泵头空转,损伤仪器。
* 基线“噪音”与漂移: 气泡流经检测器(尤其是紫外、荧光检测器)时,造成基线剧烈跳动、漂移,严重干扰目标峰识别与积分。
* 峰形畸变与保留时间偏移: 气泡占据色谱柱填料孔隙或管路空间,改变样品分子正常路径,导致峰展宽、分叉、拖尾,保留时间不稳定,定量定性结果失真。
* 检测灵敏度下降: 溶解氧可能引起某些敏感样品(如含易氧化基团化合物、荧光物质)发生降解或荧光淬灭,降低检测信号。
常用脱气方法:
* 氦气鼓泡脱气: 向流动相中持续通入氦气(溶解度低),驱赶溶解气体,效果佳但氦气成本高。
* 在线真空脱气机: 现代HPLC标配,利用特殊膜管在真空环境下高效在线脱气,方便高效。
* 超声脱气: 实验室常用辅助手段,将流动相置于超声波清洗器中震荡促使气体逸出,简便但效果相对有限,常作为预处理或与其他方法联用。
* 真空抽滤脱气: 在溶剂过滤的同时进行真空脱气,一举两得。
广州中森检测:气泡干扰实战排除
广州中森检测实验室在分析某复杂样品时,发现基线持续异常波动,保留时间漂移,峰形异常。工程师系统排查后,锁定问题根源:甲醇-水混合流动相未经充分脱气,溶解气体在系统内析出形成微小气泡。 这些气泡干扰了泵的稳定输送,并在流经检测池时引起光路异常波动。解决方案清晰明确:立即对流动相进行严格在线脱气(并辅以超声预处理)。实施后,基线迅速恢复平稳,峰形尖锐对称,保留时间稳定,数据可靠性得到根本保障。
结论: 流动相脱气绝非可有可无的步骤。它是消除气泡干扰、确保液相色谱系统压力稳定、基线平稳、峰形良好、数据准确重复的基石。无论是采用高效的在线脱气机,还是结合超声、真空抽滤等辅助手段,彻底脱气都是获取可信赖分析结果的必经之路。广州中森检测的案例再次印证:忽视这一关键环节,再精密的仪器也可能产出失真的数据。