向融化并冷至40℃-45℃的培养基中接入试验菌悬液(1%),混匀,使培养基含菌浓度为5105 CFU/mL~5106 CFU/mL,倾注到平皿内,每皿约15mL-20 mL,转动平皿,使菌液与培养基混匀,静置凝固。
牛津杯法,是《中国药典》2015年版***残留量检查法,按照此方法进行药膏、牙膏等粘稠产品的抑菌环测试,获得的抑菌环形状较理想、重复性较好。操作中要特别注意,在培养基上放置牛津杯时,用无菌镊子轻轻加压,使杯底与培养基表面接触无空隙,并且在加样过程中,由于该类样品粘稠流动性较差,需确保牛津杯内样品加实、无孔洞,加入样品与培养基表面完全接触无空隙,这样才能得出数据准确且高质量的抑菌环。在培养皿转移到培养箱的过程中,还要注意轻拿轻放,避免牛津杯位置移动甚至倒翻,令试验前功尽弃。
牛津杯(内径6mm、外径8mm、高10mm),以无菌操作将灭菌的牛津杯,等距离均匀垂直放置在培养基上,轻轻加压,使其与培养基接触无空隙,每个平板放3支牛津杯。