济南金泉化工有限公司坐落于“家家泉水,户户重柳”的具有深厚文化底蕴的泉城--济南。我公司是科工贸一体综合性企业,并代理国内外各大化工生产企业的产品。我公司经营的化工产品涉及多种行业,各种类别。主要包括:增塑剂、阻燃剂、电镀及金属热处理原材料、软化水及无水处理材料、洗涤日化原料、油漆涂料原料、砼外加剂原料、磷化材料、催化剂、助剂、、饲料及兽药添加剂、食品添加剂等。
磷酸三(2-氯已基)酯降解菌的降解条件优化研究
采用H-1菌株降解有机磷系阻燃剂磷酸三(2-氯已基)酯(TCEP),通过单因素试验和正交试验对降解条件进行优化,得到TCEP的佳生物降解条件:温度为30℃、p H为7.0、培养时间为7 d、TCEP初始浓度为20 mg/L,此条件下TCEP的降解率达到大,为86.00%。其中,温度对TCEP降解的影响zui大,其次是TCEP的初始浓度及p H,培养时间的影响小。
TCEP 溶液,0.5M(TCEP Solution)操作步骤(一)获得目的基因1、通过PCR方法:以含目的基因的质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段。2、通过RT-PCR方法:用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA,以mRNA为模板,逆转录形成cDNA链,以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。(二)构建重组表达载体1、TCEP 溶液,0.5M(TCEP Solution)载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。2、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体。
TCEP 溶液,0.5M(TCEP Solution)操作步骤 获得含重组表达质粒的表达1、 将连接产物转化大肠DH5α,根据重组载体的标志(抗Amp或蓝白斑)作筛选,挑取单斑,碱裂解法小量抽提质粒,双酶切初步鉴定。2、 测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确,进入下步操作。否则应筛选更多,重复亚或亚至不同酶切位点。3、 以此重组质粒DNA转化表达宿主菌的感受态细胞。诱导表达1、 TCEP 溶液,0.5M(TCEP Solution)挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃过夜培养。2、按1∶50比例稀释过夜菌,一般将1ml菌加入到含50mlLB培养基的300ml培养瓶中, 37℃震荡培养至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大约需3hr)。3、取部分液体作为未诱导的对照组,余下的加入IPTG诱导剂至终浓度0.4mM作为实验组,两组继续37℃震荡培养3hr。4、分别取菌体1ml, 离心12000g×30s收获沉淀,用100μl 1%SDS重悬,混匀, 70℃10min。5、离心12000g×1min,取上清作为样品,可做SDS-PAGE等分析。
以上信息由专业从事增塑剂TCEP批发的济南金泉化工于2024/7/12 6:02:24发布
转载请注明来源:http://m.tz1288.com/qynews/jinquanhg-2784318249.html
上一条:细沙回收机报价服务介绍「多图」
下一条:昆山升降货梯公司在线咨询「多图」