原位末端凋亡检测(Tunel)
实验原理: TUNEL技术可对组织或细胞中凋亡小体或单个凋亡细胞进行染色,能准确反映细胞凋亡典型的生物化学和形态特征。凋亡细胞内内源性核酸内切酶被而将自身染色体DNA切断成缺口或3-OH末端片段这一特点,利用脱氧核苷酸末端转移酶将标有标记物(如,生物素或荧光素)的脱氧核苷酸转移到3-OH末端,再用组化法或荧光检测凋亡细胞。
结1核病是严重威胁人类健康的传1染性疾病,每年约有200万人死于该病,其死1亡率在传1染性疾病中仅低于艾1滋病,随着医1疗诊断技术的迅猛发展,结1核病病理诊断经历了单一形态学和联合特殊染色,到如今利用分子病理基因检测技术进行准确诊断的三个阶段。
我科早在全1国建立了系统性结1核病分子病理诊断技术的平台,率1先将分子病理诊断技术在结1核病中应用并推广,解决了传统病理对菌阴肺结1核及肺外结1核病的诊断率低、结1核病与非结1核分枝杆1菌病无法鉴别以及耐药结1核病无法诊断等难题。同时,我科作为中华医学会结1核病学分会金1牌病理培训基地,负责组织制定了结1核病病理诊断规范、培训了大量的专1业技术人员,为形成结1核病病理学综合诊治新模式做出了卓1越贡献!
原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精1确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。
原位杂交的特点是杂交在显微镜载玻片上中期染色体标本上进行。所谓原位即指标本上DNA原位变性,在利用放1射性或非放1射性标记的已知核酸探针杂交后,通过放1射自显影或非放1射性检测体系来检测染色体上特异DNA或RNA顺序,可用放1射性颗粒在某条染色体的区带出现的频率或荧光的强弱来确定探针的位置,从而进行准确的基因定位。
原位杂交的应用范围:
①细胞特异性mRNA转录的定位,可用于基因图谱,基因表达和基因组进化的研究;
②感1染组织中病毒DNA/RNA的检测和定位,如EB病毒mRNA、人类乳1头状瘤1病毒和巨细胞病毒DNA的检测;
③癌基因、抑癌基因及各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测;
④基因在染色体上的定位;
⑤检测染色体的变化,如染色体数量异常和染色体易位等;
⑥分裂间期细胞遗传学的研究,如遗传病的产前诊断和某些遗传病基因携带者的确定,某些肿1瘤的诊断和生物学剂量测定等。
以上信息由专业从事植物组织原位杂交技术服务的科锐诺于2024/7/3 9:50:44发布
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