在显微镜下观察人体组织,必须将组织切成以微米为单位的薄片,使其透光并易于观察,但直接切取柔软组织是难以办到的。 石蜡包埋法是将“支持物质”-石蜡渗入组织内部,而水与石蜡又是不相混合的,所以在浸蜡和包埋前必须将组织内所含的水分脱去。一般是浸入逐级增加浓度的酒精来完成。
由于酒精和石蜡不能混合,再用或冬青油置换出组织中的酒精,使其透明,然后放入融化的石蜡中。石蜡包埋--将浸蜡的组织块置于包埋框中,冷却后组织块便具有石蜡的硬度,切片机便能将组织切成薄片。切片进行连续切片,厚5μm左右,放入45℃漂烘仪内进行展片。待蜡片展平后进行裱片。将切片放置60C温箱3~5h,使切片粘贴牢固,待用。但是需要注意的是切片时必须保持切片刀锐利,切片要薄而平整、烤片的温度不宜过高,高温烤片对抗原有破坏作用。
石蜡切片制作流程1.取材:取材必须新鲜,切取材料时刀要锐利避免挤压组织,一般厚度不超过2mm,大小不超过5×5mm2,取后立即投入固定液。
2.固定:固定剂为组织块体积的10~15倍,一般为4%的中性多聚甲醛,固定时长24小时。
3.脱水:70%酒精→85%酒精→90%酒精→95%酒精→无水乙醇Ⅰ→无水乙醇Ⅱ(不同组织脱水时间不同)
4.透明:透明剂能同时与脱水剂和石蜡混合,它取代了脱水剂后,石蜡便能顺利地渗入组织
以上信息由专业从事植物番红固绿染色检测技术服务的科锐诺于2024/7/14 9:13:25发布
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