外泌体分离提取方案。主要方案包括：
1、差速超1速离心法；
适用于细胞上清、灌洗液、尿液等大体积的样品；
2、基于PEG沉淀原理的试剂盒法；
适用于血1清、脑脊液等小体积的样品；
3、超滤提取法；
适用于细菌培养液或外泌体含量较低的样品浓缩。亦可搭配超1速离心法，做进一步的提取。
外泌体是细胞外囊泡的一种，其膜来源与粒径范围与细胞外囊泡相似，电镜下，显示出典型的茶托状超微结构。实际操作中，通过常规的单一的方法很难鉴定外泌体。鉴定外泌体需要包含形态、粒径、表面分子标记物等多方面的鉴定。具体方法包括：透射电镜（形态鉴定）、NTA检测（粒径及浓度鉴定）、WB（分子标志物）。NTA检测作为外泌体鉴定的经典方法之一，可同时反映出检测样品的浓度及粒径。质量较好，纯度较高的外泌体样品，粒径分布在30-150nm，原液浓度在10^9左右。为了保证检测质量，对每一个样品，都会进行3次技术重复。检测周期为2-3个工作日，可当天到样当天出结果。
抑制基质金属蛋白酶（MMPs）
MMPs主要负责细胞外基质的降解，尤其是构成结构的胶原纤维与弹力纤维，故MMPs是调节皮肤光老化的主要靶标之一。
外泌体对MMPs的调节能减少层弹性和胶原纤维的损伤，改善层老化。
通过减少氧化应激来延缓皮肤衰老
紫外线辐射可产生大量ROS（即活性氧），影响成纤维细胞功能，诱导MMPs合成，损伤细胞外基质成分（如胶原蛋白、弹力蛋白等）。衰老成纤维细胞较正常细胞可产生更多ROS。
自噬是一个吞噬自身细胞质蛋白或细胞器并使其包被进入囊泡，并与溶酶体融合形成自噬溶酶体，降解其所包裹的内容物的过程，借此实现细胞本身的代谢需要和某些细胞器的更新。自噬体，其直径一般为 300 ~ 900 nm，平均 500 nm，囊泡内常见的包含物有胞质成分和某些细胞器如线粒体、内吞体、过氧化物酶体等。与其他细胞器相比，自噬体的半衰期很短，只有 8 min 左右，说明自噬是细胞对于环境变化的有效反应。
以上信息由专业从事NTA技术服务的科锐诺于2024/8/15 8:14:53发布
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