山东富舜新材料科技有限公司座落在美丽的“泉城”济南。公司是集化学科研、开发、生产、销售、服务为一体的综合型企业。我公司拥有先进的生产设备,完善的产品检测手段和质量保证体系。我公司的员工具有较强的责任感。经过多年的发展,现已形成添加剂、阻燃剂、和化工助剂三大类上百个品种。公司本着“诚信经营、专注品质”的宗旨,参与到激烈的市场竞争中来,以好的产品质量,优惠的产品价格,令人满意的销售服务,赢得大家的支持与信赖。山东富舜新材料科技有限公司的诚信、实力和产品质量获得业界的认可。欢迎各界朋友莅临参观、指导和业务洽谈。
考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量的原理是什么
在酸性条件下,考马斯亮兰G-250染料与蛋白质疏水区结合,导致da吸收峰由465 nm 变为595 nm,同时颜色也由棕色变为蓝色,该蓝色化合物颜色的深浅与蛋白质浓度的高低成正比关系。将蛋白质样品或稀释的BSA 与Bradford试剂混合,测量在595 nm处的吸收值,在建立由一系列稀释的BSA建立的标准曲线的情况下,蛋白质的浓度可以根据标准曲线而确定。
考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。在游离状态下呈红色,da光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm波长下有da光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡,完成反应十分迅速;其结合物在室温下1h内保持稳定。
该法是1976年Bradford建立,试剂配制简单,操作简便快捷,反应非常灵敏,灵敏度比Lowry法还高4倍,可测定微克级蛋白质含量,测定蛋白质浓度范围为0~1 000μg/mL,xaio可测2.5μg/mL蛋白质,是一种常用的微量蛋白质快速测定方法。
考马斯亮蓝有G250和R250两种。其中考马斯亮蓝G250由于与蛋白质的结合反应十分迅速,常用来作为蛋白质含量的测定。考马斯亮蓝R250与蛋白质反应虽然比较缓慢,但是可以被洗脱下去,所以可以用来对电泳条带染色。
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考马斯亮蓝染色方法
马斯亮蓝染色是用考马斯亮蓝进行蛋白质染色的方法。考马斯亮蓝是一种阴离子染料, 常用考马斯亮蓝G250和R250。考马斯亮蓝 G250在游离状态下呈红色,当它与蛋白质 通过疏水结合后变为蓝色,蛋白质-色素结 合物在595nm波长下有da光吸收。其光 吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。 考马斯亮蓝G250染色可以同时固定和染色,因此能立即观察显色结果,可用来确定电泳时间,观察初步结果。考马斯亮蓝R250染色灵敏度比G250髙得多,但对酸溶蛋白、醇溶蛋白不合适,因为在染色过程中,蛋白质会溶解在染色液或脱色液中。可用于SDS-PAGE 或非变性PAGE蛋白电泳的快速染色,或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。
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亮蓝(Brilliant Blue FCF)别名为食用青色1号(日),是由苯jia醛邻磺酸与N-乙ji,N-(3-磺基苄基)-苯an缩合后氧化,利用现代的生物技术制成的食用合成色素。亮蓝是一种人工合成食用染料,外观为红紫色均匀粉末或颗粒,有金属光泽,无臭,亮蓝具有酸性染料的特性,能使动物纤维着色。易溶于水(18.7g/100mL,21℃),呈绿光蓝色溶液,溶于乙醇(1.5g/100mL,95%乙醇,21℃)、甘油、丙二醇。耐光、耐热性强。对柠檬酸、酒石酸、碱均稳定、色泽鲜艳、调色自然、着色力强、色调不易受PH值影响。
本品为有金属光泽,带红色的紫色粉末或颗粒,无臭味。易溶于水,呈绿色蓝色溶液 ,溶于乙醇、甘油、丙二醇。耐光、耐热性强。对柠檬酸、酒石酸、碱均稳定。
以上信息由专业从事亮蓝供应商的富舜新材料于2024/7/6 7:26:04发布
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