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考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量的原理是什么
在酸性条件下，考马斯亮兰G-250染料与蛋白质疏水区结合，导致da吸收峰由465 nm 变为595 nm，同时颜色也由棕色变为蓝色,该蓝色化合物颜色的深浅与蛋白质浓度的高低成正比关系。将蛋白质样品或稀释的BSA 与Bradford试剂混合，测量在595 nm处的吸收值，在建立由一系列稀释的BSA建立的标准曲线的情况下，蛋白质的浓度可以根据标准曲线而确定。
考马斯亮蓝G-250（Coomassie brilliant blue G-250）测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。在游离状态下呈红色，da光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质-色素结合物在595nm波长下有da光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡，完成反应十分迅速；其结合物在室温下1h内保持稳定。
该法是1976年Bradford建立，试剂配制简单，操作简便快捷，反应非常灵敏，灵敏度比Lowry法还高4倍，可测定微克级蛋白质含量，测定蛋白质浓度范围为0～1 000μg/mL，xaio可测2.5μg/mL蛋白质，是一种常用的微量蛋白质快速测定方法。
考马斯亮蓝有G250和R250两种。其中考马斯亮蓝G250由于与蛋白质的结合反应十分迅速，常用来作为蛋白质含量的测定。考马斯亮蓝R250与蛋白质反应虽然比较缓慢，但是可以被洗脱下去，所以可以用来对电泳条带染色。
亮蓝
亮蓝，又名食用蓝色1号(日本)、食用蓝色2号，属水溶性非偶氮类着色剂。分子式C37H34N2Na2O9S3，相对分子质量792.86。亮蓝为食用蓝色色素,属于人工合成色素,是由邻磺酸与N--N- (3-磺基苄基)-经缩合、氧化而制得的。属于偶氮类化合物。可在食品、药品、化妆品等行业中作着色剂用。食品行业中适用于糕点、糖果、饮料等的着色。
中文名称
亮蓝
性质
带有金属光泽的红紫色颗粒或粉末
特点
无臭，水溶液呈蓝色
别名
酸性艳蓝G
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基本介绍
中文名：亮蓝
别名：酸性蓝 90；酸性艳蓝G；亮蓝；考马斯亮兰G250；考马斯亮蓝G250；Brilliant Blue鍳；亮蓝G；考马斯亮蓝G-250生物染色剂
英文名：Acid Blue 90
化学式：C47H48N3NaO7S2
CAS号：6104-58-1
MDL：MFCD00012141
摩尔质量：854.02
外观：带金属光泽的深紫至青铜色颗粒或粉末
使用量：一般为0.025g/kg。
.使用方法：将准确称量的本品置于容器中，逐渐加入适量温水，并不断搅拌使之完全溶解，所得溶液即可用于着色。
使用过程中应注意避免或减少酸、减、氧化计、还原计、金属离子、微生物等物质的不良影响，并注意免受高温与暴晒，以防褪色或变色。
复合着色剂的使用：根据需要，可将本品与本公司生产的其它色泽的着色剂按适当比例配置各种不同的颜色。
该色素稳定性优良，可安全地用于食品、饮料、化妆品、饲料、玩具、食品包装材料等的着色。
【保质期】5年
【使用说明】用户在使用本品前应仔细阅读GB2760《食品添加剂使用卫生标准》，各个单色品种的使用范围和使用量会有所不同，该标准详细规定了各个品种食品着色剂的使用范围和限制使用量
【使用范围】可用于果汁（味）饮料、碳酸饮料、配置酒、糖果、糕点上彩装、红绿丝等食品的着色
【使用量】见瓶体。
【复合着色剂的使用】根据需要，可将本品与本公司生产的其他色泽的着色剂按适当比例配制各种不同的颜色。
以上信息由专业从事洗手液亮蓝批发的富舜新材料于2024/4/29 9:03:47发布
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