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PCR实验室为什么要进行三区隔离？
PCR反应过程中不断进行升温降温，液体蒸发又冷凝，PCR管中部分空气形成气溶胶，携带大量的DNA扩增产物(注意，1ng扩增产物中可作为模板的DNA片段数量，超过1ng起始模板中可扩增DNA片段数量的几百万倍甚至更高。比如人的基因组DNA有30亿个bp，要扩增的单拷贝基因片段是300bp，1ng起始模板中可以作为模板DNA片段只占总起始模板DNA总量的千万分之一)。如果在实验室打开含PCR扩增产物的管盖，大量携带DNA扩增产物的气溶胶就会涌出，扩散到空气中，从而对环境造成污染。
虽然在整个空间环境中DNA的含量很低，但由于理论上只要有1个可做为模板的DNA片段也能PCR扩增成功，这就是为什么在污染环境中阴性对照也能扩增出条带的原因。所以在PCR实验室(比如临床PCR检验实验室)，通常有四区隔离(或至少是三区隔离)的要求。
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PCR实验室为什么要进行三区隔离？既然PCR三区隔离的目的是为了阻断气溶胶的交流，请注意以下细节，思考一下气溶胶来自哪里：
1. 每个区域都应配备专门的移液器，不可交叉混用。我们的一位用户拿电泳室的移液器加模板，阴性对照扩出了很亮的条带。
2. 每个区域都应配备专门的移液器吸头，不可交叉混用。
3. 如果条件允许，在PCRⅢ区工作结束后再次进入PCR I区需要更换实验服、一次性鞋套、帽子、手套。
4. 在PCR I区、PCRⅡ区配备带滤芯吸头。
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PCR实验室建设过程中产生的废液种类有哪些，处理措施有哪些？
对于实验室废液的收集和管理，根据不同废液的化学特性，实验室可将废液分类存放在统一的密封容器中，同时应标明废液的种类和存放时间。
“实验室”处理不同类型的废液：
无机酸：将废酸慢慢倒入过量的碳酸钠或氢氧化钙水溶液中或用废碱相互中和，中和后用大量水冲洗。
、氨水：用6mol/L盐酸溶液中和，用大量清水冲洗。
含废液：加入使pH值在10以上，加入过量的（3%）溶液，使CN-氧化分解，可加入过量的次和溶液，静置2天，经检测安全后，可倒入常规废液桶中。
普通简易废液：如、、等，可直接倒入废液桶中。废液桶尽量不要密封，不能装得太满（可装3/4）。
PCR实验室的设备设置会产生大量的化学废液。这种废液不允许随意倒入下水道。相关有明确的管理规定。所以我们一定要注意这个知识哦！
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PCR实验室的设计规范
区域气压调节
试剂准备区和样品处理区宜呈微正压，以防外界含核酸气溶胶的空气进入，造成污染，可以通过控制进风风量大于排风风量达到正压效果；核酸扩增区和产物分析区应呈微负压，以防含核酸的气溶胶扩散出去污染试剂与样品，可以通过控制排风风量大于进风风量达到负压效果。PCR实验室缓冲区内可设置正压，使得室内空气不流向室外，室外空气不流向室内。
各区域通过气压调节，使得在整个PCR实验过程中，试剂和样品免受气溶胶污染，并降低扩增产物对操作人员和环境的污染。另外各个区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、人员流动与气流，形成单向流程的保护屏障，避免实验之间的相互干扰，防止核酸气溶胶对实验过程造成污染产生假性结果。
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以上信息由专业从事PCR实验室改造的山西东胜科星于2024/8/5 10:29:26发布
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