光度计的光的检验。分别用符合规定的截止滤光片，以空气为参比，测量其透射比值，即，为仪器在相应波长下的杂散辐射率。由于物质浓度的不同，吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度也不相同，从而通过对物质吸光度或透过率的测量判定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。温度和湿度是影响仪器性能的重要因素。他们可以引起机械部件的锈蚀，使金属镜面的光洁度下降，引起仪器机械部分的误差或性能下降。

光电管的灵敏度比硒光电池高。光电倍增管不仅灵，敏度比普通光电管灵敏，而且响应速度快，是目前高、中档分光光度计中常用的一种检测器。分光光度计，又称光谱仪，是将成分复杂的光，分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780nm的可见光区和波长范围为200～380nm的紫外光区。分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸，蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。

分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光线透过测试的样品后，部分光线被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。为了保证在使用紫外可见分光光度计的使用准确，在进行使用该设备时候一定要能记好进行调零和能够好的调校准确，尤其在使用中参比溶液就为空白溶液。检测器是将光信号转变为电信号的装置。常用的检测器有硒光电池、光电管、光电倍增管和光电二极管阵列检测器。硒光电池结构简单价格便宜，但长时间曝光易疲劳，灵敏度也不高。

广大用户们在使用紫外可见分光光度计设备时候，如果需要在吸取池吸取样品，就要用手指拿着毛玻璃两侧才行，吸取的样品要能达到池体的五分之四为好。由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后，发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线。光度计的稳定度的检验。在零点不受光的条件下，用零点调节器将仪器调至零点，观察3分钟读取透射比的变化，即，为零点稳定性。在仪器测量范围两端向中间靠10nm处，调节零点后，盖上样品室盖（打开光门），使光电管受光，调节透射比为95%察3分钟读取透射比的变化，为光电流稳定性。