PCR实验室工作基本原则

实验室的清洁应当按试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区的方向进行。不同的实验区域应当有其各自的清洁用具以防止交叉污染。

PCR实验室各区功能及主要设备

样品制备区：主要进行样品的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。本区主要设备有冰箱、生物安全柜、离心机、加样器、振荡器、恒温水浴等。

PCR实验室布局

PCR实验室原则上为试剂准备区、样品制备区、扩增区和扩增产物分析区四个单独的工作区域并设有***走廊，各工作区域应设缓冲间，工作区与缓冲间宜安装连锁装置。

PCR实验室注意事项——扩增产物分析区

核酸扩增后产物的分析方法多种多样，如膜上或微孔板或芯片上探针杂交方法直接或酶切后琼脂糖凝胶电泳、Southern转移、核酸测序方法、质谱分析等。

实验室的气流也应从扩增前区流向扩增后区，不得逆向流动。各工作区顶部应安装紫外灯，紫外灯的波长为254nm，每20㎡一支40W的紫外灯。

PCR实验室又叫基因扩增实验，PCR是聚合酶链式反应简称。是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA，可看作生物体外的特殊DNA。通过DNA基因追系统，能迅速掌握生物体内的病毒含量，其***度高达纳米级别。

试剂准备区：主要进行试剂的制备、分装和主反应混合液的制备。试剂和用于样品制作的材料应直接运送至该区，不得经过其它区域。试剂原材料必须贮存在本区内，并在本区内制备成所需的试剂。本区主要设备有天平、冰箱、离心机、加样器、振荡器等。

扩增产物分析区：扩增产物的测定。本区主要设备加样器和水浴箱等。本区的压力梯度的要求为：相对于邻近区域为负压，以避免扩增产物从本区扩散至其它区域。

PCR实验室的设计原则

使用实时荧光PCR仪，扩增区、扩增产物分析区可合并；

采用样本处理、核酸提取及扩增检测为一体的自动化分析仪，则标本制备区、扩增区、扩增产物分析区可合并。

PCR实验室注意事项——扩增区

为避免气溶胶所致的污染，应当尽量减少在本区内的走动。必须注意的是，所有经过检测的反应管不得在此区域打开。

不同的工作区域使用不同的工作服（例如不同的颜色）。工作人员离开各工作区域时，不得将工作服带出。