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博奥龙公司主要产品有抗0体制0备全套产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗;品类齐全的内参标签抗0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关试剂及诸多特色产品和特色技术服务。
Western Blot-抗0体检测技术服务?
一、服务内容
1、从动物细胞、人或动物组织、细菌、植物等样品中提取蛋白,重组蛋白、血0清、培养上清等样品
2、对样品中蛋白进行半定量分析
3、Western blot检测
(1) 电泳:聚丙0烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)分离蛋白样品
(2) 湿法转印(BLOTING:Tank Transfer)
(3) 杂交:用抗0体鉴定膜上的特定蛋白(INCUBATION: Antibody)
(4) 化学发光检测(ECL),胶片曝光,TotalLab Quant软件读取IOD值(可选)
1. 为了获得实验zui佳效果,请根据实验调整zui佳工作稀释度;
2. 使用时应按所需的浓度进行稀释,现用现配;
3. 如果一次使用很少可以将其适当分装后使用,这样可以有效的防止试剂污染;
4. 虽然本试剂在有效期过后很长一段时间仍可以使用,但还是强烈建议您在管体规定的有效期内正确使用;
5. 本产品仅用于科研,不能用于人体实验或人体治0疗
水佐剂免0疫步骤
步骤一:用生理盐水将抗原稀释到2倍zui终浓度。备注:推荐使用的抗原用量为(1)免0疫原性较弱的亚单位蛋白每针次1~50μg(通常为10~20μg);(2)免0疫原性较强的灭活全病毒和病毒样颗粒每针次0.1~10μg(通常为1~2μg)。
步骤二:充分混匀佐剂,无菌条件下取出所需量与抗原按体积比1:1迅速混匀。备注:本佐剂产生沉淀属正常现象,与抗原混合操作越快越好。
步骤三:通过后腿小腿肌肉注0射免0疫小鼠,每只小鼠100μl。备注:本佐剂与抗原混合后产生沉淀属正常现象,抽入针管前应充分混匀,抽入针管后应尽快注0射。
步骤四:第21天按同样方式加强免0疫一针。备注:每次佐剂和抗原现配现用。
步骤五、第35天采微量尾血进行ELISA测定,抗0体滴度应在1:10000~1:10000000 范围内, 随后即可摘眼球采全血或进行脾细胞融合。备注:若极偶尔情况下抗0体滴度达不到实验需求,可在第42天再按同样方式加强免0疫一针。
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