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来源:2592作者:2021/11/18 19:04:00






新技术提升蛋白质结晶成功率

超构材料21世纪初被提出,截至目前它仍然是非常活跃的前沿领域。其中的微结构,大小尺度与它作用的蛋白质尺寸相当,因此得以对蛋白质的结晶过程施加干预,对蛋白质的聚集态形成起到促进作用,从而降低了两步成核中的步能垒。其次,通过材料本体结构的晶格对聚集态蛋白质分子进行引导排列,促进蛋白质分子的有序排列和晶核形成,从而降低了两步成核中的第二步能垒。

尽管通过实验和理论证明了超构材料在蛋白质结晶方面的巨大潜力,但要充分发挥其优势则必须兼容当前蛋白质结晶通过的高通量筛选系统。目前国际上普遍采用液体处理机器人来进行高通量结晶筛选,筛选一个结晶条件的蛋白样品消耗体积为纳升级别。因此,如何快速,稳定地将成核剂添加到高通量系统的同时,又不对结晶系统造成大的影响成为急需解决的问题。

随后通过优化生产和制备工艺,考察了各生产因素对成核剂尺寸和稳定性的影响,确定了适合高通量蛋白质结晶筛选的成核剂混悬剂的制备工艺流程。这是一种含有具有表面超结构的有机无机复合材料,其尺寸分布在几百纳米到几微米之间。该产品的组成为材料颗粒与水溶液的混悬液。在蛋白质结晶筛选实验中,使用该产品有助于提高蛋白质结晶筛选的成功率,包括改善晶体的分辨率和筛选新的结晶条件,使不结晶或难结晶的蛋白质成功结晶,展现了巨大的应用潜力,使用该成核剂已经成功结晶和解析十多个蛋白质晶体结构。

此外,针对能够结晶的蛋白质分子,成核剂混悬液在筛选新的结晶条件,提升结晶的分辨率方面同样有效。目前,***院已经与国内超过18个实验室开展了合作,助力我国的生命科学和生物研究。






蛋白质晶体板介绍

蛋白质晶体结构,对蛋白质晶体用X射线衍射法解出蛋白质分子中各原子排列的三维结构。在晶体中各蛋白质分子以有序的晶胞形式重复排列,其形成受蛋白质的纯度和浓度、pH值、温度、沉淀剂等影响。由于遗传工程、同步辐射装置、探测和分析技术、结晶自动化等技术的飞跃进步,已获得的蛋白质晶体结构从初“蛋白质数据库”

目前,仿生合成是制备纯文石的有效方法之一,它是依据生物矿化原理,以有机物的组装体为模板制备出具有的结构及优异的物理和化学性能的无机材料。本文利用生物矿化原理,在常温常压下以新型蛋白质,即竹蛏韧带纤维状蛋白质层为基底,采用气体扩散法,通过氯化钙溶液和二氧化碳反应制备了纳米文石晶体且具有梭状,捆状,球状,花状,状和板片状超结构。




蛋白结晶板

生长蛋白质晶体是X射线衍射技 术解析蛋白质分子结构的主要瓶颈问题之一.影响蛋白质结晶的因素很多,其中温度是影响蛋白质结晶的重要因素,但在实践中并未受到广泛重视.总结了恒温和变 温对蛋白质可结晶性和晶体质量的影响,发现温度控制既可以获得更多的蛋白质结晶条件,又可以提高蛋白质晶体质量,因此,温度控制是蛋白质结晶工作中应当考 虑的重要因素。




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