制备液相知多少
色谱分析的目的
分析色谱的目的,是分析出混合物中一个(或者几个)纯物质的含量;制备色谱的目的,是从混合物中得到纯物质。为了加快分离的时间与提高分离的效率,制备色谱的的进样品量很大,导致制备色谱柱子的分离负荷的相应加大,也就必须加大色谱柱填料,增大制备色谱的直径和长度,使用的相对多的流动相。然而,当色谱柱上样品负载加大的时候,往往导致柱效急剧下降而得不到纯的产品。制备色谱,要解决容量与柱子效果之间的矛盾,对重现性也要考虑。从经济上来说。制备色谱要争取少用填料,少用溶剂,要尽可能多的得到产品。
液相色谱仪应用范围
它的应用范围比较大,而且有不断拓展的趋势。制备纯化样品是它的基础功能,通过色谱分离,样品中目标物质被分离出来有待进一步研究,比如分离水样中有机物、食品中以备分析等。然后是天然成分研究,有助于中药学的发展。分析前人留下的珍贵药典,通过药性研究造福人类。提高产品质量,以提高它的价值和效用,比如纯化药品、纯化蛋白质制品等。还有一个方向是用于产品合成的研究,通过获得一些纯度较高的化合物将以促进合成实验的进行。
制备液相色谱特点和优点
高压—压力可达150~300Kg/cm2。色谱柱每米降的压为75 Kg/cm2以上。
高速—流速为0.1~10.0 ml/min。
高效—可达5000塔板每米。在一根柱中同时分离成份可达100种。
高灵敏度—紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。
HPLC与经典液相色谱相比有以下优点:
速度快—通常分析一个样品在15~30 min,有些样品甚至在5 min内即可完成。
分辨率高—可选择固定相和流动相以达到较好分离效果。
灵敏度高—紫外检测器可达0.01ng,荧光和电化学检测器可达0.1pg。
柱子可反复使用—用一根色谱柱可分离不同的化合物。
样品量少,容易回收—样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或做制备。
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