反相色谱分离纯化后，怎样除去流动相产品中的TFA和乙腈或其他杂质？

TFA是反相色谱分离中常用的添加剂。可以用冻干的办法去除，国外许多文献是这样报道的。还可以试试离子交换、凝胶层析、甚至透析和超滤，其中，离子交换层析效果比较好，还可以起到浓缩样品的作用。

首先，冻干的办法应该可以几乎完全地除去TFA和乙腈，药品实验前尽量先检测一下冻干品中的残留量，只要不超过允许范围，这种办法是很简单、有效的。

其次，如果你的药品的分装量不大的话(<100ug)，建议你用离子交换层析，尽量装一个小一点儿的柱子，让含盐洗脱峰的蛋白浓度达10mg/mL以上，稀释后完全符合试验要求。如果用分子筛，考虑稀释，尽量也先过一个离子交换。此外可以试试疏水层析。如果产品是碱的话，可能会形成TFA盐，这样通过上述方法就无法除去。一般可以用碱水洗，然后将产品萃取出来。或者在里面加入一定量的盐酸，再干燥后形成盐酸盐。

工业制备色谱

制备纯化效率：对整个色谱制备纯化工艺的评价，尤其是成本方面的考量。

纯度、收率都是有定量的数值决定，而制备纯化效率则是个复杂的评价过程，这个过程主要是对成本（物料成本、时间成本、人力成本）、安全性、一致性等多个方面考量。分离纯化工艺中的进样量、纯化时间、纯化重现性（一致性）、安全性等等都是实际生产过程中各企业需要考虑到的方面，尤其是成规模的企业对制备效率（成本、一致性、安全性）的控制极为看重。

什么是色谱填料？

1. 亲水色谱填料：

主要适用于非极性至中等极性的中小分子化合物的分离，硅胶表面的硅羟基或其极性基团极性较强。主要应用于合成化学、天然产物、精细化工、石油产品等领域的分离和提纯。

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色谱柱大小

与气体相比，液体的密度和粘度更高，因此HPLC色谱柱通常较短且较宽。典型尺寸为10或25厘米，φ为0.46。

但是更大的色谱柱也已用于制备规模的应用，比如φ10、20、30的液相制备色谱柱。

恒谱生有各种直径大小的分析、制备液相色谱柱可供选择，柱管由316L不锈钢制成，不锈钢柱内壁多经过抛光，减小管壁效应，提高柱效的同时还能做到平衡时间短，高流速，低背压，缩短分析时间，节约溶剂，降低成本。

另一方面，由于气体密度较小且粘度较低，因此GC中建议使用更长的内径较窄的色谱柱。毛细管柱的长度可以达到几米。