液相色谱

液相色谱是一类分离与分析技术，其特点是以液体作为流动相，固定相可以有多种形式，如纸、薄板和填充床等。在色谱技术发展的过程中．为了区分各种方法，根据固定相的形式产生了各自的命名，如纸色谱、薄层色谱和柱液相色谱。经典液相色谱的流动相是依靠重力缓慢地流过色谱柱，因此固定相的粒度不可能太小(100μm～150μm左右)。分离后的样品是被分级收集后再进行分析的，使得经典液相色谱不仅分离效率低、分析速度慢，而且操作也比较复杂。

液相色谱仪的使用特点进行分析概要

　液相色谱仪是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术中，流动相改为高压输送，色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。　　液相色谱仪特点：　　

1、高压：液相色谱法以液体为流动相，液体流经色谱柱，受到阻力较大，为了迅速地通过色谱柱，必须对载液施加高压。一般可达150～350×105Pa；　　

2、高速：流动相在柱内的流速较经典色谱快得多，一般可达1～10ml/min。液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多，一般少于1h；　　

3、效率很高：近来研究出许多新型固定相，使分离效率大大提高；　　

4、高灵敏度：液相色谱已广泛采用高灵敏度的检测器，进一步提高了分析的灵敏度。如荧光检测器灵敏度可达10-11g。另外，用样量小，一般几个微升；　　

5、适应范围宽

液相色谱仪的构造

液相色谱系统主要由流动相储液瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录仪组成，其整体组成类似于气相色谱，但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。液相色谱的输液泵要求输液量恒定平稳，进样系统要求进样便利、切换严密。同时，由于液体流动相黏度远远高于气体，为了减低柱压，液相色谱的色谱柱一般比较粗，长度也远小于气相色谱柱。

液相色谱的前世今生

早在古代罗马时期，人们已知道将一滴含有混合色素的溶液滴在一块布或一片纸上，通过观察溶液展开产生的同心圆环来分析染料与色素。实际上，这种简单操作已经采用了现代色谱学的基本原理。

19世纪中叶，德国化学家Runge对古罗马人的这种方法作了重要的改进，使其具有良好的重现性与定量能力，使盐溶液可在纸上分离；另外，化学家Goppalsr-oeder也在长条纸上分离了染料和动植物色素，这些研究标志着纸色谱法的建立，并逐步发展成为现代色谱技术。

1903年，俄国植物学家Tswett在华沙自然科学学会生物学会会议上发表了题为“一种新型吸附现象及其在生化分析上的应用”中，提出了应用吸附原理分离植物色素的新方法，这一工作标志着现代色谱学的开始。他将碳酸钙装入竖直的玻璃柱中，从顶端倒入植物色素的石油的醚浸取液，进一步采用溶剂冲洗，使溶质在柱的不同部位形成色带，首先向人们公开展示了采用色谱法提纯的植物色素溶液以及色谱图显示着彩色环带的柱管。Tswett将这种方法命名为色谱，管内填充物被称之为固定相，冲洗剂被称之为流动相。