超级制备色谱系统

制备色谱到底是什么？

固定相的选择，硅胶、键合固定相（如C18）、离子交换树脂 、聚酰胺、 氧化铝、 凝胶等都可以作为色谱柱的填料。 有不少文献报道，对填料可以进行一下处理提高了分离效果，如，对硅胶进行的（或缓冲液）处理。装柱方法的选择：根据固定相颗粒度和柱子的尺寸，采用不同的装柱方法，往往装填越好分离效果越好。装柱效果跟填料的颗粒度关系很大，颗粒度的减少会导致装柱的难度。一般来说，颗粒直径小于20－30um的固定相采用湿法装填。所谓“敲击－装填”技术适用于颗粒直径大于25um的固定相。湿法的目的是迫使相对稀松的 固定相悬浆以高速装入色谱柱子，从而减少空隙的形成。然而，当柱直径大于20mm，所加压力为30－40bar时，高压悬浆装填技术就变得十分复杂。为将小颗粒固定相装入更大得制备型色谱柱，可采用柱长压缩技术。这种方法，先将固定相悬浆（或偶尔是干填充物）装入柱中加压，利用物理方法将其压紧。压紧的方法有两种：径向压缩和轴向压缩。 湿法装柱需要一定的设备，在柱子填完后，应用有柱效的测量，对柱效低的柱子应该重填。

高效液相色谱 ( HPLC)

压力低

泵不输液：流动相走空、管路中有空气、未充分排空、溶剂入口过滤头堵塞、单向阀污染均可能引起泵不输液。首先检查溶剂瓶内是否有溶剂、管路中是否充满气体，进行排空（如排空废液口无液体流出使用手动抽，至有连续液体流出）；排空后依然无压力、压力偏低或压力波动，且废液口无废液流出，超声清洗单向阀或更换单向阀，无改善将溶剂入口过滤头取下，查看压力是否正常，如滤头堵塞超声清洗或更换（注：安捷伦溶剂入口过滤头为陶瓷材质，不可以超声，使用1%～10%硝酸浸泡过夜）。

基线漂移

1.检测器出口阻塞。（高压造成流通池窗口，产生噪音基线）

取出阻塞物或更换管子。参考检测器手册更换流通池窗。

2.流动相配比不当或流速变化

更改配比或流速。为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速。

3.柱平衡慢，特别是流动相发生变化时

用中等强度的溶剂进行冲洗，更改流动相时，在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。

4.流动相污染、变质或由低品质溶剂配成

检查流动相的组成。用的化学试剂及HPLC级的溶剂

基线噪音

原因和解决方法1、 漏液

检查接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要，更换密封。检查流通池是否漏液。

2、流动相污染、变质或由低质溶剂配成

检查流动相的组成。

3、流动相各溶剂不相溶

选择互溶的流动相

4、检测器/记录仪电子元件的问题

断开检测器和记录仪的电源，检查并更正。

5、系统内有气泡

用强极性溶液清洗系统

6、检测器内有气泡

清洗检测器，在检测器后面安装背景压力调节器