什么是液相色谱？

液相色谱（liquid chromatography，LC）是一种色谱技术，用于分离和分析溶液中混合物的化学成分，以确定是否存在或不存在特定成分，如果存在，则存在多少。我们中的许多人会从上学开始就熟悉平面LC的形式，在滤纸上打上黑色墨水标记，将一端浸入水中，然后观察墨水中的成分颜色是否分开。但是，分析应用中使用的大多数LC均基于柱色谱法，这将是本文的重点。顾名思义，液相色谱（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是使用高色谱分辨率进行分离的高的性能分析。分离的组分也可以在检测后使用馏分收集器分离，作为纯化的手段。HPLC有多种不同的配置，可用于分离分子量从半挥发性小分子到几万千道尔顿的大蛋白生物分子的溶解组分。液相色谱法是一种非常流行的分析技术，广泛用于环境监控，农业领域。

液相色谱仪

根据应用方向可以分为制备、半制备、分析等类型，使用前两种的应用都是为了制备样品，而后一种则是为了分析样品，做定性定量实验。它们在原理上相同，却也有着各自的区别，现在对前两类液相色谱仪进行比较。

都是制备型仪器，制备、半制备液相色谱仪针对的样品量和分离速度不同，半制备分离纯化的样品量少，由于泵的压力和流速会低一些，分离效率会相对低一些。但它在纯化小样和分离微量元素方面有很大用途。制备型仪器可以用在生产中，比如食品原料中农残去处，药品生产中去除无效成分或有毒成分等。半制备型仪器更多用在实验中，它经常和全自动固相萃取仪搭配使用来更大程度纯化样品。由于泵的功率不同，仪器中各个部分的尺寸和材质也略有不同，半制备型仪器中各部分需要承受的压力较小，处理样品量少，所以从色谱柱到管道、阀门等通量都较小，而制备型仪器就要大一些以应对较大量的样品进入。操作方面基本一致，除了尺寸外没有什么其它实质区别。

液相色谱的注意事项

特别提示

1).流动相均需色谱纯度，水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。2).柱子是非常脆弱的，首先做的方法，先不要让液体过柱子。

3).所有过柱子的液体均需严格的过滤。

4).压力不能太大，尽量不要超过150kgf/cm2.

5).因为缓冲试剂遇有机的溶剂，会结晶，有损色谱柱，所以，每次由有机相变流动相或流动相变有机相均需用蒸馏水清洗。