液相色谱仪的使用特点进行分析概要
液相色谱仪是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术中,流动相改为高压输送,色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱;同时柱后连有高灵敏度的检测器,可对流出物进行连续检测。 液相色谱仪特点:
1、高压:液相色谱法以液体为流动相,液体流经色谱柱,受到阻力较大,为了迅速地通过色谱柱,必须对载液施加高压。一般可达150~350×105Pa;
2、高速:流动相在柱内的流速较经典色谱快得多,一般可达1~10ml/min。液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多,一般少于1h;
3、效率很高:近来研究出许多新型固定相,使分离效率大大提高;
4、高灵敏度:液相色谱已广泛采用高灵敏度的检测器,进一步提高了分析的灵敏度。如荧光检测器灵敏度可达10-11g。另外,用样量小,一般几个微升;
5、适应范围宽
液相色谱仪
根据应用方向可以分为制备、半制备、分析等类型,使用前两种的应用都是为了制备样品,而后一种则是为了分析样品,做定性定量实验。它们在原理上相同,却也有着各自的区别,现在对前两类液相色谱仪进行比较。
都是制备型仪器,制备、半制备液相色谱仪针对的样品量和分离速度不同,半制备分离纯化的样品量少,由于泵的压力和流速会低一些,分离效率会相对低一些。但它在纯化小样和分离微量元素方面有很大用途。制备型仪器可以用在生产中,比如食品原料中农残去处,药品生产中去除无效成分或有毒成分等。半制备型仪器更多用在实验中,它经常和全自动固相萃取仪搭配使用来更大程度纯化样品。由于泵的功率不同,仪器中各个部分的尺寸和材质也略有不同,半制备型仪器中各部分需要承受的压力较小,处理样品量少,所以从色谱柱到管道、阀门等通量都较小,而制备型仪器就要大一些以应对较大量的样品进入。操作方面基本一致,除了尺寸外没有什么其它实质区别。
半制备液相色谱层析系统开机
1、接通电脑和仪器电源(接通电源之前可先把吸头拿到要使用的流动相瓶中);
2、开仪器电源开关,一般先上后下,下为检测器开关;
3、检查流动相是否够,仪器上记录的溶剂量时候正确;
4、开电脑;
5、打开仪器联机软件进入界面,点击启动设置泵流速为10,此时仪器中应该有液体流出;
6、点击平衡然后点击每个波长和调整冲一段时间,待压力稳定后可以进样。
液相色谱仪分类方法
1、按分离目的可分:实验室液相色谱仪和工业液相色谱仪。
2、按固定相物理状态可分:液液色谱仪和液固色谱仪。
3、按色谱柱形状可分:填充柱液相色谱仪和平板液相色谱仪。
4、按分离原理可分:吸附液相色谱仪、分配液相色谱仪、离子交换液相色谱仪和凝胶液相色谱仪。
注:①吸附色谱:利用固体吸附表面对不同组分物理吸附性能的差异达到分离的色谱。②分配色谱:利用不同的组分在两相中有不同的分配系数以达到分离的色谱。③离子交换色谱:利用离子交换原理的达到分离的色谱。
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