制备液相色谱的特点

      1、制备液相色谱采用了自动进样器与全封闭样品瓶,极大地解放了人力;

　　2、使用高精度HPLC制备色谱泵,重现性良好;

　　3、使用了仪器标配ELSD检测器,可用于无紫外吸收样品检测;

　　4、使用高压梯度混合,不需要脱气机,梯度基本无滞后;

　　5、可使用5u或10u的制备色谱柱,分离效能可与分析柱等同;

　　6、制备色谱采用灯-钨灯组合光源,光谱范围覆盖190nm-900nm;

　　7、带有单色仪自校正功能,波长准确性可达0.2 nm;

　　8、带有光源自检功能,管理光源寿命,提醒及时更换;

　　9、可使用各种光程的外置式流通池,更换极为方便;

　　10、仪器支持FLASH色谱组件与中压色谱组件,使用成本更低;

　　11、检测器同时检测4个波长的色谱峰,并可以同图显示 并指导收集;

　　12、采用1200线高分辨光栅,在紫外-可见范围具有良好的分光效能。

液相色谱的应用

(1)分离混合物液相色谱法只要求样品能制成溶液，不受样品挥发性的限制，流动相可选择的范围宽，固定相的种类繁多，因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。通过与试样预处理技术相配合，液相色谱法所达到的高分辨率和高灵敏度，可分离并同时测定性质上十分相近的物质，能够分离复杂混合物中的微量成分。并且随着固定相的发展，还可在充分保持生化物质活性的条件下完成对其的分离。

(2)生化分析由于液相色谱法具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用，流出组分易收集等优点，因而被广泛应用到生物化学、食品分析、药的研究、环境分析、无机分析等各种领域，并已成为解决生化分析问题有前途的方法。

(3)仪器联用液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发展方向。液相色谱一质谱联用技术受到普遍重视，如分析氨基甲酸酯多核芳烃等：液相色谱一红外光谱联用也发展很快，如在环境污染分析测定水中的烃类等．使环境污染分析得到新的发展。

液相色谱的操作步骤

1).首先对流动相进行过滤，根据需要选择不同的滤膜，一般为有机系和水系，常用的孔径为0.20um和0.45um。

2).对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。

3).正常情况下，仪器首先用甲醇冲洗10-20分钟，然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲试剂，则要二次重蒸水冲洗10-20分钟，直至色谱柱中有机相冲净为止)。

4).一般情况下，流动相冲洗20-30分钟后，仪器方可稳定，重要的是仪器基线走后，方可进样测试。

5).同时进两针标样，将其结果相比较，其结果的比值在0.98-1.02之间后，就可以正式进行样品的测试了。

6).样品测试结束后，就要进行色谱仪及色谱柱的清洗和维护。如流动相为缓冲试剂，同样也要用重蒸水清洗10-20分钟，方可用有机相进行保护，否则，有损色谱柱。

7).关机时，先关计算机，再关液相色谱。

8).填写登记本，由负责人签字。

那么如何选择液相色谱仪？通过哪些指标来选择呢？

下面给大家介绍几条选择液相色谱仪的方法仅供大家参考。液相色谱仪有输液泵、自动进样器、柱温箱、检测器、柱温箱等。判断液相色谱仪的指标有噪音，漂移，很小检测浓度，定性定量重复性等。

1、液相色谱仪噪音是指由液相色谱仪的电器元件、温度波动、电压的线性脉冲以及其他液相色谱仪非溶质作用产生的高频噪声和基线的无规则波动。噪音的大小直接关系到液相色谱仪检测器的检测灵敏度，噪音越大，检测的灵敏度就越低。

2、液相色谱仪检测器很小检测浓度(很小检测限)是反映液相色谱仪检测器灵敏度的重要参数。CL=2×Nd×C/H(CL：液相色谱仪很小检测浓度Nd:噪音C：液相色谱仪样品浓度很小检测浓度H：样品峰高)。

3、液相色谱仪检测器漂移是指仪器稳定后一段时间内基线漂离液相色谱仪基线原点的距离，通常用来衡量液相色谱仪稳定快慢。高的品质的液相色谱仪能在较短的时间内达到稳定，从而在一定程度上提高了液相色谱仪分析效率。

4、液相色谱仪定性定量重复性定性定量重复性主要是考核液相色谱仪稳定性的指标，这对于分析液相色谱仪样品来说是非常重要的。好的液相色谱仪其稳定性应该是十分好的，这就要求多次液相色谱仪进样保留时间及含量的一致性，这样做出来的液相色谱仪检测结果才能使人信服。