固定底物酶底物法(DefinedSubsrateTechno

固定底物酶底物法(Defined Subsrate ?Technology， DST,以下简称DST-酶底物法）采用大肠菌群细術能产生P-半乳糖苷酶(P-D-gaUctosUlase)分解邻硝ji苯P-D-半乳吡喃糖苷0NPG(Ortho-Uropheny-p-D-galaclopyranoside)使培养液呈黄色，以及大肠埃希氏菌产生P-葡萄糖醛酸酶(p-glucimmidase)分解MUG使培养液在波长366nm紫外光下产生荧光的原理,来判断水样中是否含有大肠菌群、粪大肠菌群（耐热大肠菌群)及大肠埃希氏菌。该方法与传统多管发酵法相比具有以下优点：可以采用成品的培养基及试剂，操作方便;密封培养;无二次污染；实验用品易于集中无害化处理；无需确认试验;DST-酶底物法监测时间较短，18?24h即可同时判断水样中粪大肠菌群(耐热大肠菌群）的MPN值酶底物法。且多管发酵法每升水样中较低检出限为2个粪大肠菌群，而固定底物酶底物法却能抑制200万个异样细菌，准确监测到1个粪大肠菌群，具有更高的监测灵敏性和更宽的监测范围。

食品大肠菌群检测-

食品大肠菌群检测--平板计数法

相比于MPN计数法，平板计数法更适用于大肠菌群含量较高的食品。但大肠菌群多少算是含量较高呢？里没有明确规定，但通常认为，产品大肠菌群以100CFU/g（mL）为界，超过这个含量一般认为是含量较高。但具体什么时候选用平板计数法进行大肠菌群的检测，大部分情况还是要看你的产品执行的标准。假如产品标准要求大肠菌群含量的单位为CFU/g（mL），那必须选用平板计数法。若是/g(mL)或者MPN/100g(mL)，就应选择MPN计数法，MPN法具体选用哪版此处不再赘述。因此，根据自己产品的情况选择适当的检测方法。

大肠超标会有哪些危害?

　食品安全是国人的大事，因为民以食为天，人们每天都要吃食物，如果食物的质量关把不好，会直接导致健康出问题。这次发现食物的大肠超标，确实令人担忧。虽然，大肠是和人类共存的，但是如果大肠的数量过多，依然会对人的胃肠造成伤害。我们的食品是允许少量的大肠存在的，只要是符合国家检测的标准就不会伤到健康，那我们来看一下大肠超标会有哪些危害？

　　1、引起肠道外。大肠离开人体之后，很容易引起其他的，可以引起、、盂炎等等，大肠还可能引发腹膜炎、阑尾炎，有一些抵抗力差的人或者儿童，大肠之后甚至可能会进入血液引起。对于刚出生30天之内的婴儿，如果大肠，可能会导致大肠性，即使也会影响孩子后天的智力发育。

　　2、 导致胃肠不适，出现腹泻。肠道内的大肠超标会直接导致胃肠道症状，会出现胀气等，的表现是腹泻，轻度的腹泻可以自愈，但是严重的腹泻可能会持续好几天，需要经过才能痊愈。

大肠菌群平板计数法检测

平板计数法

　　大肠平板计数法检测分为两个阶段。在初培养中，选取2～3 个适宜的连续稀释度， 每个稀释度接种2个无菌平皿，每皿接种1mL。同时取1mL生理盐水加入另外的无菌平皿作阴性对照。迅速将 15mL～20mL冷却至 46℃的结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）加入每个平皿中。小心地旋转平皿，使培养基与样液充分混匀，等到琼脂凝固以后，再加入3mL～4mLVRBA 覆盖平板表层。翻转平板铺匀后，放在 36（℃±1）℃培养18～24h。平板菌落数按照以下方法选择：选取菌落数在 15CFU～150CFU之间的平板，分别计数平板上出现的典型和的大肠菌群菌落。典型菌落呈现紫红色，并且菌落周围有红色的胆盐沉淀环，菌落直径为 不小于0.5mm。证实试验为：从VRBA平板上挑取10 个不同类型的典型和菌落，分别移种到BGLB肉汤管内，（36℃±1）℃培养24～48h，观察产气情况。凡是BGLB肉汤管产气，就可以报告是大肠菌群阳性。证实是大肠菌群阳性的试管比例乘以以上步骤中计数的平板菌落数总数，再乘以稀释倍数，就是每g（mL）样品中大肠菌群数。

　　大肠菌群平板计数法操作起来比较简便，带有菌落的平板可以直接计数，还可以观察菌落特征，可见的菌落与大肠菌群量可以直接对应，便于得出定量结果，这种方法的缺点是因为大肠菌群在平板上很小，所以肉眼有时难以观察，需要用放大镜仔细辨认。验证实验需要挑选菌落，因此受人主观的影响很大，如果没有挑对或挑取的数量不够多都可能导致假阴性结果[3]。