硼酸亲和层析介质
纳微推出新一代硼酸亲和填料,它是利用硼酸与顺式二羟基化合物之间的共价配位作用实现分离纯化。在碱性条件下,硼
酸基团能与顺式二羟基结构作用,生成稳定的五元环络合物,分子被介质吸附;在酸性条件下络合被打开,分子从介质上解吸
附。硼酸亲和层析介质可以用于含有顺式二羟基化合物的分离纯化,如糖蛋白、核苷、核苷酸、糖类等的分离纯化。
五大类层析技术
-凝胶过滤(GF)
-离子交换(IEX)
-亲和层析(AC)
-疏水层析(HIC)
-反相层析(RPC)
基架–颗粒越细、大小越均匀,分辨率越高,但反压亦较高(SOURCE基架例外)
物理稳定性–新一代介质较坚固,能承受高流速,同时保持柱床体积和结构稳定,省却每次重新装柱,提高重复性化学稳定性-新一代介质能承受pH,高盐度,促溶剂和,利于开发分离条件和在位清洗(CIP),大大延长介质寿命并提高重复性
亲和层析
配体偶联在介质上,纯化能与配体结合的生物分子;通常一步便能得到高纯的样品;配体的特异性越强,所获产品纯度越高用亲和介质提纯单抗非常方便,以重组蛋白A的载量高;蛋白G则能结合更多不同源的IgG
金属鳌合介质(Chelating Sepharose Fast Flow)可反复鳌合不同金属,再用已结合依赖不同金属的蛋白,一种介质可做多种纯化工作
其他常用配体包括:肝素-纯化.酶III,凝血因子脂酶等Cibacron Blue(颜料)-纯化白蛋白,干扰素等外源凝集素如球蛋白A-多糖,糖蛋白等Glutathione谷胱甘三肽-重组融合蛋白等等.
可自行把所需配体偶联到活化偶联介质,的是NHS activated 4 Fast Flow和CNBr activated 4 FF;要注意化学基好不会参与配体和被纯化生物分子的结合作用中
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