连续色谱层析技术
尽管传统色谱分离技术被广为采用,但其仍存在一系列问题亟待解决:
? 溶剂消耗量大,综合生产成本居高不下;
? 填料使用量大,单位填料产出少,工业化生产成本进一步提高;
? 某些低分离度品种分离受限,无法工业化;
? 对于某些特殊样品(如手性药i物),没有太好的解决办法等等。
然而连续色谱分离技术能够实现物料连续使用,应用同等规模的填料和溶剂却可大幅度提高样品处理量,对于某些化学结构相类似的成分,仍然能够获得较理想的分离度和样品回收率。该技术主要能够很好地解决大、小分子原i料药、功能糖等的连续化分离问题,在降低缓冲液用量的同时,提高填料利用率,降低生产成本,目前已经广泛应用于石油化工、食品工程和生物化工等领域,如:
ü 糖醇类分离:果葡糖浆、菊粉、低聚果糖、海藻糖、阿拉伯糖、木糖醇、核糖等;
ü 手性药i物和天然产物分离:紫杉醇、鱼i油、芍药苷、大豆卵磷脂、氟i西汀、酮洛i芬等;
ü 精细化工:香精香料、色素、不饱和脂肪酸等;
ü 石化:PX及其类似物、碳五碳六中正异构烷烃等;
ü 生物大分子:蛋白多肽(亲和层析)、核酸等。
层析填料介质
单分散基球替代多分散基球 层析介质粒径大小和粒径分布是影响层析分离的重要参数。粒径分布越均匀,装柱越容易、柱床越稳定、柱效越高、流速越均匀、洗脱越集中、分离效率越高、流动相用量越少,柱与柱重复性也越好;Protein A 介质被誉为层析介质皇冠上的明珠,价格昂贵,可是市场上Protein A 介质都是采用粒径分布较宽的基球。
层析填料的选择
当您需要在大规模条件下内实现和高通量,POROS 散装层析填料是工业级生物分离的业内标准。 这些突破性的硬胶和带有的化学结构的填料具有佳粒径和孔径分布,已广泛应用于多种层析。 POROS 50 μm 填料被证明在一系列流速下皆具有超高的分辨率、动态结合载量和捕获效率,通常用于应用于精纯当中。
CaptureSelect 亲和填料具有出色的选择性,可提高产量并改善初始捕获步骤中的纯度。 我们已经开发出大量产品用于各种生物制品(比如和片段、融合蛋白、和病毒)的大规模纯化
疏水层析
生物分子表面大都有或强或弱的疏水区域,在不同环境下,与各种疏水介质产生不同强弱的结合
高离子强度可加强疏水性
跟离子交换相反,高盐吸附,低盐洗脱;洗脱样品又可直接或稍加稀释后加上其他层析柱,作为连接层析步骤的桥梁,取代盐析沉淀技术
比反相层析的配体密度低很多,无须洗脱,保存生物活性
配体种类繁多,很难预测哪一种、哪一个条件适合,可用疏水层析试盒选择介质
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