液相色谱仪
仪器结构特点:
液相色谱仪是以液体作为流动相的色谱分离方法
流动相具有运载样品分子和选择性分离的双重作用
适用于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的大分子化合物(常温进样不破坏中的大分子化合物)
色谱柱类型,流动相比例,操作参数(柱温,流动相梯度)可优化分离效果
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正确的液相色谱仪使用方法
随着实验方法的大量开发和成熟,目前液相色谱在包括食品、药品、化工、生命、环境等领域内大量使用,其作为一种通用分析检测设备在高校、科研院所、医院、监管机构、工厂企业中广泛配置。为了提高液相色谱仪的工作效率,延长液相色谱仪使用寿命,应该如何正确的使用液相色谱仪!
1.检查溶剂托盘托盘上的溶剂是否足量,以溶剂液面超过过输液管过滤头5厘米以上为宜。
2.检查输液管内部有否气泡,若有,应及时通过排液阀排出。
3.对溶剂(针对项看是否需要补充溶剂)和样品进行处理,过滤,脱气。
4.打开主机电源,依次打开检测器,泵A,泵B,柱箱的电源
5.打开电脑,开启色谱工作站
6.先在工作站中开启活塞泵,以所需的流动相平衡系统(约需30min)
7.打开灯,等待系统基线走稳
8.开始进样检测
为什么液相色谱适合分析低沸点化学物质?
这个说法不能理解成液相色谱不适合分析高沸点物质。
其实这是因为气相色谱一般需要对物质进行加热,然后根据汽化温度(沸点)不同,物质先后进入检测器。检测器一般是氢火焰检测器为主。
如果一个物质沸点太低,那么很容易出峰非常快,和溶剂出在一起,在谱图前端,根本看不出来(如果你看过气相色谱图你就知道了)。
此时就需要用HPLC,因为HPLC分开物质依据的是物质和色谱柱填料的亲和力强弱,而不是沸点。
举个例子,如果我想要知道我一个样本中是否含有(沸点85℃),用气相色谱是非常困难的。因为沸点100℃以下的物质在GC里面出峰是极度困难的。
但是我如果用HPLC配合反相柱,此时就可以看得出来。
多说一点,实际上还有一些情况我不能用HPLC来分析,就是当一个化合物极性非常大或者极性非常小,此时我无论用正相色谱柱还是反相色谱柱,都会有一个问题,就是我的化合物要么出在前面和溶剂在一起,要么根本出不出来。
比如咪唑,咪唑的亲水性太强,我经常在HPLC反相柱里面分离不开,此时一般我要分析,就会借助GC(沸点256℃)
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