如何选择层析填料
按照层析技术原理分类选择填料:凝胶过滤填料选择、离子交换填料选择、亲和填料选择、疏水填料选择、反相填料选择
层析工艺不同阶段选择填料的一般规律根据目的物的性质选择填料
根据目的物的性质选择填料
根据规模选择合适的层析预装柱层析空柱选择
层析空柱选择
特点:结合了Sephadex的高选择性和琼脂糖的高物理稳定性,机械稳定性好,高分辨率高化学稳定性
亲和层析
配体偶联在介质上,纯化能与配体结合的生物分子;通常一步便能得到高纯的样品;配体的特异性越强,所获产品纯度越高用亲和介质提纯单抗非常方便,以重组蛋白A的载量高;蛋白G则能结合更多不同源的IgG
金属鳌合介质(Chelating Sepharose Fast Flow)可反复鳌合不同金属,再用已结合依赖不同金属的蛋白,一种介质可做多种纯化工作
其他常用配体包括:肝素-纯化.酶III,凝血因子脂酶等Cibacron Blue(颜料)-纯化白蛋白,干扰素等外源凝集素如球蛋白A-多糖,糖蛋白等Glutathione谷胱甘三肽-重组融合蛋白等等.
可自行把所需配体偶联到活化偶联介质,的是NHS activated 4 Fast Flow和CNBr activated 4 FF;要注意化学基好不会参与配体和被纯化生物分子的结合作用中
锥形封头一种负压层析设备,它包含:圆柱体上方设有快开启式紧锁卡紧的上锥形封头和上锥形卡套式接头互相卡接,上锥形封头上端设有负压插口经负压阀、气液分离设备与负压泵相接,圆柱体下方设有快开启式紧锁卡紧的下锥形封头和下锥形卡套式接头互相卡接,下锥形封头下边设有进液插口经进液管路与三通阀体上端的排液接口相连,三通阀体下边各自设有2个与进液管路连在一起的进液插口。本产品给予一种应用量少、分离出来、速度更快、周期时间短,构造简易,,没有噪音,节能型,易实际操作,一次分离出来纯净度可以达到98%之上的负压层析设备。
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