理想的连续色谱层析介质

在传统间歇式色谱法中，实验者只能采用单根色谱柱进行分离纯化，上样时只能序列式上样洗脱，这种方法虽然适合于绝大多数分离纯化，但其对于纯化介质的利用率并不高；在新型的连续色谱层析法中，实验者可以同时平行使用多根色谱柱并进行上样和洗脱，整个洗脱过程处于不间断的持续进行中，这种方法可以确保使用更少的缓冲液来i大化填料的利用率，

层析填料的分类

在把微细分散的固体或是附着于固体表面的液体作为固定相，把液体（与上述液体不相混合的）或气体作为移动相的系统中，使试料混合物中的各成分边保持向两相分布的平衡状态边移动，利用各成分对固定相亲和力不同所引起的移动速度差，将它们彼此分离开的定性与定量分析方法，称为层析，亦称色谱法。根据移动相种类的不同，分为液体层析、气体层析二种。

层析填料的类型

在柱层析中，移动相从加入试料的一端展开到达另一端后，继续展开使各成分和移动相一起向柱外分别溶出，这就是广泛使用的所谓洗提层析（elution chromatography）。层析根据固定相与溶质（试料）间亲和力的差异分为吸附型、分配型、离子交换型（离子交换层析）等三种类型。但这并不是很严格的，有时常见到其中间类型。此外，近来也应用亲和层析，即将与基质类似的化合物（通常为共价键）结合到固定相上，再利用其特异的亲和性沉淀与其对应的特定的酶或蛋白质。

层析填料交换分离

离子交换层析根据化合物的净电荷进行分离。带负电荷或正电荷的官能团共价结合于固相载体基质，分别成为阳离子交换剂和阴离子交换剂。当一个带电荷的分子加入到带有相反电荷的交换剂时，它就会被吸附，同时，带相同电荷的离子和中性分子则被洗脱到层析柱的外水体积里。带电荷分子的结合是可逆的，通常可用盐或PＨ梯度洗脱吸附的分子。 离子交换层析可以有多种应用，包括分离和纯化生物分子，分离无机离子，试剂和水的去离子化，盐转换以及去除金属离子、化乙锭和ＳＤＳ。 化合物的分离策略。如果分子在ＰＨ高于其等电点时稳定，可使用阴离子交换树脂。如果分子在ＰＨ低于其等电点时稳定，则使用阳离子交换树脂。