液相色谱柱的保存
1.反向色谱柱实验后的保养:
使用缓冲液或含盐的流动相,实验完后应用10%的/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用冲洗30分钟。注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的,防止将填料冲塌陷。
2.长期保存色谱柱:
如,色谱柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下,对于反相柱可以储存于纯或中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水中,并将堵头堵上,储存温度尽量是室温。
液相色谱仪中柱温箱有怎么的效果
液相色谱仪的柱温箱是在作业当中的,为了保证试验的顺利进行和终究数据的准确性,咱们有必要了解柱温箱究竟起着怎么的效果。
1、可以使保存时刻相对稳定,然后进步需要进行定性辨别的可信度;
2、保存时刻相对稳定是进行定量的根底,不一样的保存时刻不仅不能判别其成份的一致性,一起,因为保存时刻不一样峰面积也必将发生变化,其检查成果的可信度终将会遭到质疑。
3、温度低时,因流动相黏度添加而使检查时刻延伸,一起还也许添加真空泵的磨损,然后影响设备的使用寿命。
4、温度低的时分还因溶解度相对降低而呈现缓冲盐结晶而阻塞泵、进样阀、管道、色谱柱的现象。
5、温度低时还因溶解度降低使杂质吸附在填料上而难于洗脱,然后使得色谱柱的使用寿命缩短。
6、温差较大时,因保存时刻不稳必将添加检查作业不必要的费事。
液相色谱柱外界因素影响
色谱是一种分离分析手段,分离是,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等。市售的用于HPLC的各种微粒填料如多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球(包括离子交换树脂)、多孔碳等,其粒度一般为3,5,7,10μm等,柱效理论值可达5~16万/米。对于一般的分析只需5000塔板数的柱效;对于同系物分析,只要500即可;对于较难分离物质对则可采用高达2万的柱子,因此一般10~30cm左右的柱长就能满足复杂混合物分析的需要。
柱效受柱内外因素影响,为使色谱柱达到佳效率,除柱外死体积要小外,还要有合理的柱结构(尽可能减少填充床以外的死体积)及装填技术。即使好的装填技术,在柱中心部位和沿管壁部位的填充情况总是不一样的,靠近管壁的部位比较疏松,易产生沟流,流速较快,影响冲洗剂的流形,使谱带加宽,这就是管壁效应。这种管壁区大约是从管壁向内算起30倍粒径的厚度。在一般的液相色谱系统中,柱外效应对柱效的影响远远大于管壁效应。
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