叶子中的色素提取可以用分离色素(纸层析法): 不同色素在层析液中的溶解度不同,溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快,反之则慢,从而使各种色素相互分离。
叶子中的色素,即提取叶子中叶绿体来中的色素。
连续色谱层析技术
尽管传统色谱分离技术被广为采用,但其仍存在一系列问题亟待解决:
? 溶剂消耗量大,综合生产成本居高不下;
? 填料使用量大,单位填料产出少,工业化生产成本进一步提高;
? 某些低分离度品种分离受限,无法工业化;
? 对于某些特殊样品(如手性药i物),没有太好的解决办法等等。
然而连续色谱分离技术能够实现物料连续使用,应用同等规模的填料和溶剂却可大幅度提高样品处理量,对于某些化学结构相类似的成分,仍然能够获得较理想的分离度和样品回收率。该技术主要能够很好地解决大、小分子原i料药、功能糖等的连续化分离问题,在降低缓冲液用量的同时,提高填料利用率,降低生产成本,目前已经广泛应用于石油化工、食品工程和生物化工等领域,如:
ü 糖醇类分离:果葡糖浆、菊粉、低聚果糖、海藻糖、阿拉伯糖、木糖醇、核糖等;
ü 手性药i物和天然产物分离:紫杉醇、鱼i油、芍药苷、大豆卵磷脂、氟i西汀、酮洛i芬等;
ü 精细化工:香精香料、色素、不饱和脂肪酸等;
ü 石化:PX及其类似物、碳五碳六中正异构烷烃等;
ü 生物大分子:蛋白多肽(亲和层析)、核酸等。
如何选择层析填料
按照层析技术原理分类选择填料:凝胶过滤填料选择、离子交换填料选择、亲和填料选择、疏水填料选择、反相填料选择
层析工艺不同阶段选择填料的一般规律根据目的物的性质选择填料
根据目的物的性质选择填料
根据规模选择合适的层析预装柱层析空柱选择
层析空柱选择
特点:结合了Sephadex的高选择性和琼脂糖的高物理稳定性,机械稳定性好,高分辨率高化学稳定性
层析填料寿命衰减的影响因素
每次装柱的过程都涉及到填料的脱气处理,及装填柱床时的压缩柱床,然后脱气时的超声或者抽滤都会对填料施压,压缩柱床也要对填料施压,反复的施压及压力控制不当也会使填料的物理性能发生变化从而影响填料的寿命。
柱床被严重污染或者进气泡时,拆装清洗比CIP效果更好,更有利于填料寿命衰减的降低。
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