离子交换层析中,为什么用氯离子洗脱阴离子

阴离子交换柱的填料是正电填料,在低盐条件下可以通过电荷相互作用吸附样品中的阴离子和负电荷物质（如DNA）.这些带负电的物质由于其带电量不同,分子大小不同,因而与正电填料之间的结合力也就不同.用梯度的氯离子（一般用氯化钠梯度,例如从100mM氯化钠线性梯度升高到1M氯化钠）洗脱挂柱样品时,氯离子会和结合上的物质竞争结合正电填料,伴随着氯离子浓度的不断升高,氯离子的竞争作用越来越强,与填料结合的物质会按照亲和力从弱到强依次洗脱下来,形成独立的洗脱峰,从而将这些物质分开.

阳离子交换柱与之正好相反,柱子填料为负电荷,用钠离子洗脱结合的正电物质.

连续色谱层析简介

众所周知，传统色谱分离技术是采用固定的色谱塔进行，***入一定量物料，然后采用洗脱剂不断洗脱，在同一出口在不同时间段就可接到不同的产品组分，此过程明显费时费力；而连续色谱分离技术则是利用不同物质在由固定相和流动相构成的体系中具有不同的分配系数，当两相作相对运动时，这些物质随流动相一起运动，并在两相间进行反复多次的分配，从而使各物质达到分离。在实际生产中，连续流层析可获得更高的产量，且成本更低，这是通过降低Protein A 填料用量和缓冲液消耗量实现的，由于操作稳定，其可更好地保证产品质量的一致性，并显著提高下游纯化的产量。传统色谱分离方式通常是单一色谱柱序列上样和洗脱，这就明显限制了介质的利用程度，而连续色谱层析技术平行采用多根色谱柱平行上样和洗脱，这种连续上样的方式无疑能够i大化介质的利用率。

1、常用的定量分析方法：标准曲线法、直接定量（外标法和内标法）

2、层析柱主要有：弗罗里硅土柱、氧化铝柱、硅胶柱、活性碳柱、其他填料层析柱子

3、液相色谱的特点是：、高速、高灵敏度、高度自动化

4、气相色谱仪常用的检测器有：火焰离子化检测器（FID）、火焰光度检测器（FPD)

电子捕获检测器（ECD）、氮磷检测器（NPD）、原子发射检测器

5、检测器的评价指标：噪声、漂移、灵敏度、线性范围与动态范围

6、气相色谱柱有：填充柱、毛细管柱（开管型和填充型）