超大孔单分散聚合物层析介质用于病毒分离纯化
传统生物层析介质不能有效用于病毒分离纯化很主要的原因是其孔径太小,病毒不能扩散到传统层析介质的内孔里,因此可及比表面积低,吸附载量低,而超大孔单分散层析介质由于粒径均匀,孔径大(>400 纳米)因此病毒可以有效的扩散到孔内部空间,使得静态吸附载量大幅度提升。超大孔结构还可以有效降低病毒与填料表面配基之间多位点结合,避免亚基的解聚,使得病毒结构稳定性得到大幅度的提高。另外超大孔聚合物层析介质用于病毒及类病毒(疫l苗)分离纯化的优点是其分离模式与传统生物制药层析分离纯化方法基本一样,容易放大生产,重复性好。但超大孔层析介质制备技术难度大,且其机械强度差,耐压性差,容易破碎,导致筛板堵塞,压力升高等缺点。虽然纳微已经可以制备孔径大于高达800纳米的超大孔径聚合物微球,但要满足病毒大规模分离纯化,还需要进一步解决超大孔微球机械强度问题。
以下为纳微超大孔径DEAE离子交换层析介质在流l感病毒(H5N2)纯化中的数据,结果显示超大孔介质对流l感病毒的分离纯化比传统层析介质具有明显的优势。
为什么选择纳微色谱和层析介质
纳微拥有世界领i先的单分散硅胶色谱填料和聚合物层析介质的制造技术,及大规模生产能力和质量保障体系从基球的生产到表面改性到装柱全过程都在纳微内部完成以确保产品的可控性,可追溯性及供应安全性纳微色谱填料具有精i确的粒径大小,极窄的粒径分布,可控的孔道结构及优化的表面功能基团密度,使其具有高柱效,易装柱,机械强度高,寿命长等特点。
纳微可生产粒径从1.7-50μm之间任意大小单分散硅胶色谱填料以满足实验室HPLC分析检测到工业制备色谱的各种需求纳微色谱填料基质齐全,包括硅胶,聚ben乙烯及聚丙i烯酸酯三种性能互补的色谱填料纳微色谱填料涵盖正相,反相,手性,离子交换,疏水,体积排阻,亲和层析介质及特殊定制化色谱填料以满足有机化合物,手性分子,天然产物,抗i生素,多肽胰岛素,重组蛋白,抗i体,疫i苗的分离纯化纳微产品已大规模销售到欧美日韩制药公司及世界色谱公司
如何选择层析填料
按照层析技术原理分类选择填料:凝胶过滤填料选择、离子交换填料选择、亲和填料选择、疏水填料选择、反相填料选择
层析工艺不同阶段选择填料的一般规律根据目的物的性质选择填料
根据目的物的性质选择填料
根据规模选择合适的层析预装柱层析空柱选择
层析空柱选择
特点:结合了Sephadex的高选择性和琼脂糖的高物理稳定性,机械稳定性好,高分辨率高化学稳定性
层析填料寿命衰减的影响因素
每次装柱的过程都涉及到填料的脱气处理,及装填柱床时的压缩柱床,然后脱气时的超声或者抽滤都会对填料施压,压缩柱床也要对填料施压,反复的施压及压力控制不当也会使填料的物理性能发生变化从而影响填料的寿命。
柱床被严重污染或者进气泡时,拆装清洗比CIP效果更好,更有利于填料寿命衰减的降低。
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