液相色谱柱基本工作原理

在色谱法中存在两相，一相是固定不动的，我们把它叫做固定相；另一相则不断流过固定相，我们把它叫做流动相。

色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的医学教育网搜集整理。

使用外力使含有样品的流动相(气体、液体)通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时，混合物中的各组分与固定相发生相互作用。

由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中先后流出。与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。

液相色谱仪中柱温箱有怎么的效果

液相色谱仪的柱温箱是在作业当中的，为了保证试验的顺利进行和终究数据的准确性，咱们有必要了解柱温箱究竟起着怎么的效果。

1、可以使保存时刻相对稳定，然后进步需要进行定性辨别的可信度;

2、保存时刻相对稳定是进行定量的根底，不一样的保存时刻不仅不能判别其成份的一致性，一起，因为保存时刻不一样峰面积也必将发生变化，其检查成果的可信度终将会遭到质疑。

3、温度低时，因流动相黏度添加而使检查时刻延伸，一起还也许添加真空泵的磨损，然后影响设备的使用寿命。

4、温度低的时分还因溶解度相对降低而呈现缓冲盐结晶而阻塞泵、进样阀、管道、色谱柱的现象。

5、温度低时还因溶解度降低使杂质吸附在填料上而难于洗脱，然后使得色谱柱的使用寿命缩短。

6、温差较大时，因保存时刻不稳必将添加检查作业不必要的费事。

液相色谱柱的再生

因为，色谱柱是消耗品，随着使用时间或进样次数的增加，会出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰的现象，一般来说是柱效的下降。

1.反向柱的再生：

2.正相柱的再生：

3.离子交换柱的再生：

长时间在缓冲溶液中使用和进样，将导致色谱柱离子交换能力下降。用稀酸缓冲溶液冲洗可以使阳离子柱再生，反之，用稀碱缓冲溶液冲洗可以使阴离子柱再生。

特别说明：

再生过程必须随时关注柱压变化，柱压过高易导致硅胶变形与开裂及键合相极性端连接顺序紊乱，同时要保证再生时间足够。再生时尽量选择不具备在线脱气的独立泵送系统色谱仪器进行

液相色谱柱性能评价

色谱柱的性能除了与固定相性能有关外，还与填充技术有关。在正常条件下，填料粒度>20μm时，干法填充制备柱较为合适；颗粒<20μm时，湿法填充较为理想。填充方法一般有4种：①高压匀浆法，多用于分析柱和小规模制备柱的填充；②径向加压法，Waters；③轴向加压法，主要用于装填大直径柱；④干法。柱填充的技术性很强，大多数实验室使用已填充好的商品柱。