液相色谱仪在生物制药中的应用

液相色谱仪是近几十年发展起来的一种、快速的分离分析技术，是现代分离检测的重要工具。液相色谱仪是以经典液相色谱仪为基础，引入气相色谱仪的理论和实验方法，将流动相改为高压输送，采用固定相和在线检测等手段，发展而成的分离分析技术，具有高压、高速、、高灵敏度、高选择性和应用范围广等特点，成为生物制药领域发展快、应用的现代分析技术之一。

液相色谱柱样品制备

1、样品应当尽可能溶解在能与流动相相互溶的溶剂中。除特殊指明外，如使用强溶剂溶解样品柱子的分辨率将可能降低。

2、样品溶液在进样前应使用针头式过滤器对样品预先过滤。频繁改变流动相组成，会加速降低柱效。

3、色谱柱由高压匀浆法装填，能承受较高压力。为获得佳分离效果，使用时请不要超过200kgf，而且避免压力突然上升或变化，否则会造成硅胶填料的破坏，减少色谱柱的使用寿命。除特殊要求外高操作温度不要超过60℃。

液相色谱仪与气相色谱差别 

液相色谱仪在基本概念上和气相色谱器是一致的，因此 设施的基本基本原理类似，可是它们在检查层面是有不一样的地点的，有不一样的，但又有不同点：液相色谱 与气相色谱的关键差别可归结为于以下几个方面：

1、气相方法的不一样：液相色谱仪只需将试样做成水溶液，而气相色谱需加温汽化或裂化；

2、流动相的不一样，在被测组分与流动相中间、流动各相稳定相中间都具有着一定的作用力；

3、因为溶液的黏度较汽体大2个量级，使被测组分在液态流动看中的热扩散系数比在汽体流动看中约小4~5个量级； 

4、因为流动相的成分可开展普遍挑选，并可配备成二元或多元化管理体系，达到梯度方向过柱的必须，因此增强了液相色谱的屏幕分辨率（柱效率）； 

5、液相色谱选用5~10Lm细颗粒物固定不动相，使液体相在离子交换柱上透水性大大的变小，流动摩擦阻力扩大，务必依靠高压水泵运输流动相； 

6、液相色谱仪是在液相中开展，对被测组分的检验，一般选用灵巧的湿式亮度检测器，比如，紫外线度检测器、示差折光率检测器 、莹光亮度检测器等；