恒温扩增常用酶

恒温扩增的方法多种多样，其对应的酶体系也各有差别，且一般为多酶体系，在酶原料选择上相比PCR复杂，下面只列举一些主要的恒温扩增方法相关酶。

LAMP相关酶环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification, LAMP)所用酶主要为具有链置换功能的DNA聚合酶，详细原理可参考聊聊恒温扩增技术。常用酶为Bst DNA聚合酶，用于DNA链合成，同时具有链置换功能；若检测模板为RNA，则可加入逆转录酶配制成RT-LAMP反应体系。

科普｜恒温扩增试剂盒常用酶原料

NEAR相关酶

切口酶扩增反应(Nicking Enzyme Amplification Reaction, NEAR)是一种基于切刻内切酶切割特性的恒温扩增方法，详细原理可参考啥黑科技可10分钟完成核酸分子检测？。其使用的酶有两种：切刻内切酶：如Nt.BstNBI切刻内切酶，该类酶不同于常规限制性内切酶，其识别特定序列后仅在DNA其中一条链上切割形成缺口，并暴露出游离的3’端；DNA聚合酶：如Vent (exo-) DNA聚合酶或Bst DNA聚合酶，用于DNA链合成，同时具有链置换功能。

恒温快速扩增试剂盒应在什么样的温度下应用？ 

规范的ERA扩增试剂盒通过配置可在37℃-42℃的温度范畴内实际操作。过高的温度会对反映管理体系造成不好的危害，由于酶会慢慢地丧失所有活性。针对RT试剂盒，大家提议用户在40℃下运作反映，由于逆转录酶在稍高温度下具备更高的活性。 立博泰业——很多年市场销售恒温快速扩增试剂盒，企业坚持不懈用户为造物主，想用户之所感，急用户之所急，以诚为本，注重信誉度，以商品求发展趋势，以品质谋发展，大家诚挚地热烈欢迎各位同仁协作共赢未来。

恒温扩增试剂盒操作步骤

提前30分钟将试剂盒所需组分取出,室温融化。鹿荡混匀。

1).每个干粉反应管加入29.4 uL Abuffer (注意: Abuffer需完全融化混匀,否则会对实验效果产“生影响) ; 1.每个干粉反应管加入29.4 uLAbuffer (注意: Abuffer需完全融化混匀,否则会对实验效果产生影响) ;

2.每个反应管分别加入2 uL上游引物、2 uL下游引物和0.6 μ探针(引物和探针浓度为10 μM ,对于多个反应、步骤1和步骤2可以混合后再分装至反应管中)