TwistDx试剂盒
我国主要的几种检测试剂盒都是基于RT-PCR原理。因为需要检测的病毒样本浓度有高有低,高的容易检测,低浓度就会漏掉。所以PCR的方法就把病毒基因扩增很多倍,达到可以检测出来的浓度。基本操作如下:
01 收集咽拭子等病毒样本,通过试剂打碎保护病毒的蛋白质壳子,萃取病毒RNA。一方面是萃取,另一反面,打碎之后就没有了性,相对安全一些。
02 由于这次新冠是单链RNA病毒,所以要先转换成cDNA。这个可以类比像是视频文件,mp4,rmvb,avi这些都是常见格式,同一个视频不同格式,意思都一样,可以互相转换。
03 常规PCR反应,加热到94℃把DNA拉链拉开,之后再55℃-60℃让引物,就是拉链扣分别套在两条拉链上,再升温到72℃让拉链自己,用左拉链做模板造一个右拉链,用右拉链做模板造一个左拉链。这样折腾一次为一个循环,RNA数量翻一倍。之后再折腾25-30次。这样就算很少量的病毒这个时候也显现出来了。
PCR操作方法
这个方法很主流,也很经典。但是这个操作步骤太多,而且每次都是微量,手一抖就完蛋了。另外引物(就是拉链扣)的质量也是关键,如果错了拉链,那么整个检测前功尽弃。
当然还有机器清洗的问题,如果上一个阳性样本检测之后,没有洗干净设备,下一个本来阴性患者可能就会假阳性被误诊。中国大医院自己都有PCR检测仪器和人员,流程比较熟练。美国欧洲很多医院偏专科,综合性超大型少一些,本来很多检验都是委托外包第三方实验室。遇到疫情,着急出结果自己上手,可能有手法不纯熟的情况。如果又正好使用了某些中国的无证试剂盒厂商出品的无证试剂,多重误差叠加,准确度就会崩盘。
TwistDx试剂盒的相关简介
RPA 于 2006 年由 ASM Scientific Ltd(英国剑桥,由 Wellcome Trust Sanger Institute 创立)的 Niall Armes 推出。虽然RPA在等温核酸扩增技术中还没有占据很大的市场份额(根据Grand View Research报告的数据,图1A),但它正在经历着快速的发展。迄今为止,已经发表了 250 多篇有关 RPA 的出版物,并且在过去六年中 RPA 的文献数量一直在增加;值得注意的是,RPA 文献数量从 2014 年开始呈指数增长。
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