TwistDx相关问题
1. RPA能实现多重化吗?
可以。RPA技术支持在同一个管中同时进行多个扩增反应。不过,多重化的引物组合需要精心设计,以便每个引物都能同样有效的工作。需要注意的是,RPA反应的引物总量(nmol)尽量不要超标太多。如果在-一个反应中使用两个以上的扩增引物,就应该控制不同引物的量。另外,我们应当事先考虑好检测多个扩增事件的探针、设备以及荧光团的兼容性。
2.能否对模板进行定量?
可以。扩增子达到可检出水平的时间,依赖于反应起始时的模板量。初始模板的拷贝越多,扩增子就越快达到可检出水平。不过,这种定量需要精心的实验安排,确保对照反应是同时开始的。举例来说,可以利用镁离子的添加时间进行控制。因为镁离子一一旦进入体系,RPA反应就会开始。此外,较慢的扩增过程有助于更***的定量。我们可以通过调整反应条件或引物设计来减慢RPA的反应速度。
3能否进行荧光终点分析?
可以。这样比较的是反应开始时的荧光和反应结束时的荧光,荧光增强意味着发生了扩增。
4能否支持生物素或荧光标记的寡核苷酸?
支持。在RPA反应中,连有生物素或荧光团的引物与未修饰的引物表现差不多。据悉还没有发现任何差异。
5跑胶前需要回收RPA产物吗?
需要。RPA反应中的物质会干扰琼脂糖电泳,如果不进行产物回收,跑出来的带会出现拖尾。
TwistDx Liquid试剂盒
TwistAmp??Liquid试剂盒提供经甘油稳定化处理的液态RPA试剂,该形态对于在实验室执行 PCR 和其他基于酶的反应的任何人来说都非常熟悉。这些试剂各自装于单独的试管中,用户可随意从中移取任何量的酶混合液来构建自己所选的RPA反应体积,配制用于多次反应的预混液,或者以各种 RPA 组分比例进行实验以优化试验。
TwistDx试剂盒
蛋白质检测的原理很简单,就是抗原结合。一个更常用的例子就是验孕棒。快筛基本都是用的这个,如果你了,显然你就应该会有病毒特异性的蛋白质,你的身体也会针对这种病毒产生(的本质也是蛋白质),蛋白质检测就是利用这点,检测这些蛋白质是否存在。有些检验的是血液,有些检验的是鼻腔之类的不一而足,但总的来说抗原结合是非常快的,理论上数分钟到数十分钟内就可以看到结果。
自 1983 年出现经典聚合酶链反应 (PCR) 方法以来,核酸扩增已渗透到生命科学的各个领域。 然而,尽管具有基本的影响,但 PCR 已被限制在实验室的范围内,因为它需要一套复杂的热循环系统,其限制了在资源匮乏环境中的外部应用。新的等温扩增策略正在寻求通过在恒温下提供核酸来突破传统的实验室限制。在这些方法中,重组酶聚合酶扩增 (RPA) 是发展快的方法之一,尽管它的开始相对较晚,但是却经历了快速的普及和市场化。
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