试纸条操作步骤
1.根据检测样品数量取出相应数量的胶体金检测卡,并在胶体金检测卡.上做好标记。每根胶体金检测卡只能用于单次、单个样品的检测。
2.PCR或RPA扩增后,用带滤芯的吸头取适量扩增产物到新的PCR管中,用稀释液(Tris-HCL 0.05M , pH8.0或者PBS 0.01M , pH7.4)或纯水稀释
2-10倍,根据实际情况选择合适缓冲液,摸索较佳稀释倍数,吹打混匀后进行检测。
3.吸取100uL稀释的扩增产物滴加在胶体金检测卡点样孔中。
4.根据试纸条显色的情况直接读取检测结果,质控线( C线)显色后3-10min内观察结果。
5.记录检测结果,将试纸条密封丢弃在安全处。
试纸条结果判定
1.阳性(+) :
试纸条出现一条红色条带,位于质控线(C线);-条红色条带,位于检测线(T线)。阳性结果表明样本中含有待检测的核酸片段,且其数量≥试纸条的低检出量。当目的核酸产物浓度较低时,试纸条C线显色呈红色, T线呈淡红色,甚至浅粉色条带,该结果也应判定为阳性。当目的核酸产物浓度较高时,试纸条C线显色呈红色, T线呈红色,该结果也应判定为阳性。
2.阴性(-) :
试纸条质控线(C线)出现-条红色条带, 检测线(T线)没有条带。阴性结果表明样本中不含目的核酸片段,或其数量低于试纸条的低检出量。
3.无效:
试纸条质控线(C线)和检测线(T线)均未出现条带,提示所用的试纸条或扩增试剂可能已经损坏、失效或操作有误。
此时,应仔细阅读说明书,重新扩增和检测。如果问题仍然存在,应立即停止使用同一批号的产品,并与当地供应商联系。
试纸条检测方法
在使用此试剂前必须仔细阅读试剂的说明书,需严格按照试剂说明书执行有关操作,否则无法保证可靠结果。
1.准备:检测前将检测卡、样本、样品稀释液恢复至室温(15-30℃),建议检测卡在恢复室温后再拆封,并在有效期内尽快使用,防止检测卡受潮。
2.加样:待检测样品吸取4ul样本加入200ul样品稀释液进行稀释,再通过SA(链亲和素)磁珠充分吸附(建议取终浓度为10nM左右样品,每0.2mL加40ulSA磁珠,充分混匀,室温旋转孵育30-60min,用磁力架进行充分吸附后,取上清进行点样,高浓度探针或大体积可适当增加SA磁珠的用量进行反应),吸取50ul滴加在加样孔处,开始计时。
3.检测:10-15min根据质控线(C)、检测线(T)判读结果。
试纸条的抗原检测
1.根据试剂说明书,将采集样本后的鼻拭子立即置于采样管中,拭子头应在保存液中旋转混匀至少30秒,同时用手隔着采样管外壁挤压拭子头至少5次,确保样本充分洗脱于采样管中。
2.用手隔着采样管外壁将拭子头液体挤干后,将拭子弃去。采样管盖盖后,将液体垂直滴入检测卡样本孔中。
3.根据试剂说明书,等待一定时间后进行结果判读。阳性结果:“C”和“T”处均显示出红色或紫色条带,“T”处条带颜色可深可浅,均为阳性结果。阴性结果:“C”处显示出红色或紫色条带,“T”处未显示条带。无效结果:“C”处未显示出红色或紫色条带,无论“T”处是否显示条带。结果无效,需重新取试纸条重测。
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