恒温快速扩增试剂盒应在怎样的温度下使用?
标准的ERA扩增试剂盒经过配制可在37℃-42℃的温度范围内操作。过高的温度会对反应体系产生不利的影响,因为酶会逐渐地失去全部活性。对于RT试剂盒,我们建议客户在40℃下运行反应,因为逆转录酶在稍高温度下具有更高的活性。
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恒温扩增常用酶
恒温扩增的方法多种多样,其对应的酶体系也各有差别,且一般为多酶体系,在酶原料选择上相比PCR复杂,下面只列举一些主要的恒温扩增方法相关酶。
LAMP相关酶环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification, LAMP)所用酶主要为具有链置换功能的DNA聚合酶,详细原理可参考聊聊恒温扩增技术。常用酶为Bst DNA聚合酶,用于DNA链合成,同时具有链置换功能;若检测模板为RNA,则可加入逆转录酶配制成RT-LAMP反应体系。
恒温快速扩增试剂盒应在什么样的温度下应用?
规范的ERA扩增试剂盒通过配置可在37℃-42℃的温度范畴内实际操作。过高的温度会对反映管理体系造成不好的危害,由于酶会慢慢地丧失所有活性。针对RT试剂盒,大家提议用户在40℃下运作反映,由于逆转录酶在稍高温度下具备更高的活性。 立博泰业——很多年市场销售恒温快速扩增试剂盒,企业坚持不懈用户为造物主,想用户之所感,急用户之所急,以诚为本,注重信誉度,以商品求发展趋势,以品质谋发展,大家诚挚地热烈欢迎各位同仁协作共赢未来。
恒温扩增试剂盒操作步骤
提前30分钟将试剂盒所需组分取出,室温融化。鹿荡混匀。
1).每个干粉反应管加入29.4 uL Abuffer (注意: Abuffer需完全融化混匀,否则会对实验效果产“生影响) ; 1.每个干粉反应管加入29.4 uLAbuffer (注意: Abuffer需完全融化混匀,否则会对实验效果产生影响) ;
2.每个反应管分别加入2 uL上游引物、2 uL下游引物和0.6 μ探针(引物和探针浓度为10 μM ,对于多个反应、步骤1和步骤2可以混合后再分装至反应管中)
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