核酸释放剂使用方法
1.将约2μL液体样品(如全血、细胞培养液、病毒样品、粪便样品)或2mg(约半粒芝麻大小)的固体样品(如动物组织、植物叶片、种子等)加入到50μL本产品中。
注意:样品加入量可能需要根据其DNA的含量稍做调节,如果样品DNA含量少,则用量要增加,但总液体样品用量尽量不要超过本产品用量的1/10;固体样品用量尽量不要超过1mg/10μL的比例。
2.对液体样品,室温放置3分钟;对固定样品80℃加热5分钟;对难以的样品(如有厚壁的真菌、石蜡组织切片、血斑),则保温时间可以延长到10-30分钟。
3.简短振荡混匀后取样品裂解液直接进行PCR扩增或其他扩增(裂解物体积尽量不要超过反应体积的2/5,对50μL体系的扩增,加入的裂解液尽量不要超过20μL。由于各扩增体系成分不同,头次跟本产品组合时尽量做梯度测试,即在50μL的扩增反应中分别加5μL、10μL、15μL、20μL、25μL样品裂解液进行测试)。
4.其余同常规操作。
核酸释放剂概述
核酸释放剂于从各种常见的生物样品中快速提取用于核酸扩增的 DNA 样品和 RNA 样品,它具有下列特点:
1. 单溶液,操作简单,只用一步(约 5-10 分钟)即可以得到用于核酸扩增的模板, 不需要任何离心、抽提等操作步骤,比常用的 Chelex100 提取方法和方法快。
2. 即可用于 DNA 模板,又可用于 RNA 模板。
3. 跟各种后续实验兼容,包括 PCR、RT-PCR、LAMP 和 RT-LAMP。
4. 兼容性广,可以用于几乎所有的分子生物学样品,包括细菌、昆虫、真菌、各种 植物、各种动物、法医样品(包括全血液、血痕、精斑、唾液、毛发、组织样品、 口腔细胞和 FTA 卡)、石蜡组织切片等。
核酸释放剂的注意事项
1. RNA样本采集后应立即进行提取,样本质量将影响提取效果;
2.本产品不具有核酸分离与纯化功能,适用于对核酸纯度要求不高的实验;
3.如样本中有额外保存液(样本保存液中若含酶克制剂或高浓度的盐),提取的核酸样本可能会影
响后续扩增反应;
4.检测前必须仔细阅读说明书,严格按照要求进行操作;
5.全血、溶血的粪便样本,提取效果较差,建议采取其它试剂盒提取。
核酸释放剂的优势
优势1 :序列资源丰富, 除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译, 从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
优势2 :该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌类资源,每一 种检测试剂盒 均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证
及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
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