PCR革新技术-英国TwistDx Inc公司开发恒温扩增RPA
英国TwistDx Inc公司开发的重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA)--被称为是可以替代PCR的核酸检测技术,目前***新的等温扩增检测技术。以此为基础的TwistAmp? 核酸扩增产品,能够在15分钟内进行常温下的单分子核酸检测。该技术对硬件设备的要求很低,特别适合用于体外诊断、兽医、食品安全、生物防御和农业等领域。
常规PCR必须经过变性、退火、延伸三个步骤,而PCR仪本质上就是一个控制温度升降的设备。RPA反应的适宜温度在37°C - 42°C之间,无需变性,在常温下即可进行。这无疑能大大加快PCR的速度。此外,由于不需要温控设备,RPA可以真正实现便携式的快速核酸检测。
据介绍,RPA检测的灵敏度很高,能够将痕量的核酸(尤其是DNA)模板扩增到可以检出的水平,从单个模板分子得到大约1012扩增产物。而且RPA还用不着复杂的样品处理,适用于无法提取核酸的实地检测。
RPA不仅可以对扩增产物进行终点检测,还可以对扩增过程进行实时监控,甚至可以通过试纸条(侧流层析试纸条LFD)读取结果。
目前,TwistAmp? 试剂盒的扩增子长度在500bp以内。不过,经过特别优化的RPA扩增,也可以生成更长的扩增产物,或者减慢扩增速度(便于定量),甚至在更低的温度下进行反应。
RPA
RPA 便携、等温,可替代 PCR ,非常适合用于分子检测试剂、动物、食品安全、生物防御和农业中。
速度—— 检测时间 15 分钟以内;
敏感度—— 单分子检测,不需要 thermocyler ;
简单—— 稳定的冻干试剂,几乎没有硬件要求的可靠等温技术。
1.TwistAmp Basic 试剂盒( 96 次)
2.TwistAmp exo 试剂盒( 96 次)
3.TwistAmp nfo 试剂盒( 96 次)
4.Milenia Hybridtech 1 侧向流试剂条
5.Milenia Hybridtech 2 侧向流试剂条
TwistDx的未来
RPA核酸检测技术被誉为可替代PCR的犀利单分子检验技术,因为其灵敏,快速,对设备要求低,操作简易等特点。自其被开发出来之后,-直被广大科研工作者津津乐道。2009年,***较大种子公司孟山都与TwistDx公司合作进行***作物快速检测项目,旨在提高******作物移交转让效率。近年来TwistDx根据RPA检测特点, 通过在基础体系中填加不同酶和探针,开发出多款研发型和实用型检测产品,以实现多样化的RPA应用。
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