2019-noCov检测再提速!山师大研发出20分钟检测试剂盒
新型冠状病毒疫情爆发之后,山东师范大学生命学院“动物创新研究团队”成员心系疫情,在省科技厅“新型冠状病毒被染上的疫情应急技术攻关及集成应用”重大科技创新工程的支持下,同心协力,争分夺秒进行技术攻关,联合山东莱博生物科技有限公司和潍坊安普未来生物科技有限公司共同研发出新型的快速核酸检测试剂盒,目前该试剂盒已经进入国家食品药品监督管理局审查程序。
试剂盒有以下三大特点:
1、快速,操作简便,从样品处理到结果读取只需20分钟。
2、灵敏度高,较低浓度可达到10拷贝每微升。
3、特异性强,能将新冠与其他冠状病毒区分开,避免假阳性。
目前市面上的核酸检测仍是传统的荧光定量PCR方法,需要采取病毒提取、反转录、荧光定量扩增等多重操作,总体时间需要3小时以上。且,病毒提取方法需要多步骤处理样品,操作复杂,检测人员被染上的风险高。
该病毒可接触传播,飞沫传播,更可怕还可通过气溶胶传播,一旦足够浓度病毒暴露在空气中,就有可能造成人员污染。所以,我们认为国家急需一种能尽量减少检测人员对样品的接触操作,分子扩增快速,避免样品长时间暴露在空气中的新方法。
对此,团队不仅设计上述快速检测试剂,还开发出“超快速一步法传疾病样本处理方案”。该方案是集“样本保存”、“咽拭子采集”和“核酸释放”一体的快速样本前处理试剂,非常适合传疾病的样本采集,运输以及核酸提取。。
检测前仅需将装有待测样本液(浸泡过病毒样本的试剂液)的试管在沸水中浸泡10分钟,则进一步灭活病毒样本的同时,完成了待测前的处理。不仅进一步保护了检测人员,且无需依赖任何核酸提取设备。保证了全部检测流程仅需30分钟不到。
自主研发用时,引物设计需注意!
核酸试纸条三明治夹心检验法探针设计:在上下游引物中间设计一条长度为46-52nt与目的片段互补序列;5’端修饰一个抗原标记(典型FAM);5’端和3’端中间位置标记一个dSpacer(THF);3’端标记一个修饰基团,如胺基、生物素或C3-Spacer,同时要求下游引物5’端标记一个修饰基团。
该方法极其适用于现场核酸检测。可应用于初筛、食品安全、宠物疾病检测等各种不具备完整分子检测条件下的核酸测试。对操作人员***水平要求低,检测结果可信度高。
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