2019-noCov检测再提速!山师大研发出20分钟检测试剂盒
新型冠状病毒疫情爆发之后,山东师范大学生命学院“动物创新研究团队”成员心系疫情,在省科技厅“新型冠状病毒被染上的疫情应急技术攻关及集成应用”重大科技创新工程的支持下,同心协力,争分夺秒进行技术攻关,联合山东莱博生物科技有限公司和潍坊安普未来生物科技有限公司共同研发出新型的快速核酸检测试剂盒,目前该试剂盒已经进入国家食品药品监督管理局审查程序。
试剂盒有以下三大特点:
1、快速,操作简便,从样品处理到结果读取只需20分钟。
2、灵敏度高,较低浓度可达到10拷贝每微升。
3、特异性强,能将新冠与其他冠状病毒区分开,避免假阳性。
目前市面上的核酸检测仍是传统的荧光定量PCR方法,需要采取病毒提取、反转录、荧光定量扩增等多重操作,总体时间需要3小时以上。且,病毒提取方法需要多步骤处理样品,操作复杂,检测人员被染上的风险高。
该病毒可接触传播,飞沫传播,更可怕还可通过气溶胶传播,一旦足够浓度病毒暴露在空气中,就有可能造成人员污染。所以,我们认为国家急需一种能尽量减少检测人员对样品的接触操作,分子扩增快速,避免样品长时间暴露在空气中的新方法。
对此,团队不仅设计上述快速检测试剂,还开发出“超快速一步法传疾病样本处理方案”。该方案是集“样本保存”、“咽拭子采集”和“核酸释放”一体的快速样本前处理试剂,非常适合传疾病的样本采集,运输以及核酸提取。。
检测前仅需将装有待测样本液(浸泡过病毒样本的试剂液)的试管在沸水中浸泡10分钟,则进一步灭活病毒样本的同时,完成了待测前的处理。不仅进一步保护了检测人员,且无需依赖任何核酸提取设备。保证了全部检测流程仅需30分钟不到。
多酶恒温快速扩增技术在大动物分子诊断领域的应用
————MIRA助力猪疫病的检测
2018年10月开始的非洲猪疫情,很大的冲击了中国生猪养殖市场和屠宰市场。造成了市场格局的大幅变化,也提升了***和民众对畜牧养殖的认识和重视,从简单的关注食品安全开始向关注食材原料安全转移。随着疫情的逐渐缓和,疫情的检测主体已经从生猪检测向环境监控转化。例如,厂区周边取样、运送生猪的车辆取样、进出人员的衣物取样等。这些预防性检测已占据养殖场日常检测量的80%以上,因此对养殖过程中诊断提出了更高的要求,需要便携、快捷、易操作、便于临场检测的新技术,而传统PCR检测技术存在检测时间长、人员技术要求高和设备昂贵等特点,在实际应用上,越来越不适合畜牧养殖等非***区域的检测需求。而我司的MIRA技术恰恰可以弥补上述缺陷。MIRA多酶恒温快速扩增技术,模仿细胞内核酸过程,在体外、常温、恒温的状态下实现核酸的指数式扩增。其***就是利用多酶系统替代以往利用精密温控设备(PCR仪)才能完成的变性、退火、延伸等流程。
恒温快速扩增试剂盒原理概述
本试剂盒基于一种常温恒温核酸快速扩 增技术:在常温恒温条件下,重组酶和引物形成蛋白单链核苷酸的复合体Rec/ssDNA,在辅助蛋白和单链结合蛋白SSB的帮助下,侵入双链DNA模板,在侵入位点形成D-loop区域,并开始对DNA双链进行扫描;待找到与引|物互补的目的区域后,复合体Rec/ssDNA解体的同时,聚合酶也结合到引|物的3'末端,开始链的延伸。本试剂盒在39。C下,依赖核酸外切酶的作用,加入根据模版设计的特异的分子探针,使用荧光监测设备能实现对目标片段扩增过程的实时监控。
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