电泳
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电泳用琼脂糖多为粉状物,不带电荷,凝点30°C,略高于室温,使用时需现用现配,溶质需和电泳时所使用的电泳缓冲液液一致;配置琼脂糖凝胶时,会有专门的制胶板(图1)和梳子来制作凝胶块,配置凝胶时会加入荧光染料(部分荧光染料会有微毒,使用时应小心谨慎!),免去电泳后染色的步骤。
电泳的知识,你要懂得
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电泳上样时会在预留的孔中使用混合有Ladder Buffer(上样缓冲液)的DNA样品进行点样,一般每行会留出至少一孔,加入生物公司合成的Marker(混合有多种明确片段大小的DNA的溶液,作用类似于参考标尺的作用)作为参照物,用来大约估算DNA片段大小;之后便可以设置好相应的电压、电流和时间进行电泳。电泳后放入凝胶成像仪调整曝光和亮度后,就可以看到清晰的电泳条带照片,DNA条带离点样孔越远,DNA片段越小,具体大小应参考Marker的大小。
单向电泳与双向电泳
电泳可以是单向的(即一维分离)也可以是双相的。单向电泳常用来进行蛋白和核酸的分离,蛋白的双向电泳用于指纹-识别(即总蛋白成分分析)和细胞里所有蛋白的***定位。
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