DNA电泳

DNA电泳常见问题分析及解决方案

DNA条带模糊：1，DNA降解避免核酸酶污染；2，电泳缓冲液陈旧电泳缓冲液多次使用后，离子强度降低，pH值上升，缓冲能力减弱，从而影响电泳效果。建议经常更换电泳缓冲液；3，所用电泳条件不合适电泳时电压不应超过20V/cm，温度＜30℃；巨大DNA链电泳，温度应＜15℃；核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力；4， DNA上样量过多减少凝胶中DNA上样量；5，DNA样含盐过高电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐；6，有蛋白污染电泳前酚抽提去除蛋白；7，DNA变性电泳前勿加热，用20mM NaCl缓冲液稀释DNA

不规则DNA条带迁移：1， 对于λ/Hind III片段cos位点复性电泳前于65℃加热DNA 5分钟，然后在冰上冷却5分钟；2，电泳条件不合适电泳电压不超过20V/cm；温度＜30℃；经常更换电泳缓冲液；3，DNA变性以20mM NaCl Buffer稀释DNA，电泳前勿加热 

  带弱或无DNA条带：1，DNA的上样量不够增加DNA的上样量；聚酰胺凝胶电泳比琼脂糖电泳灵敏度稍高，上样量可适当降低；2， DNA降解避免DNA的核酸酶污染；3，DNA走出凝胶缩短电泳时间，降低电压，增强凝胶浓度；4，对于EB染色的DNA，所用光源不合适应用短波长（254nm）的紫外光源

DNA带缺失：1，小DNA带走出凝胶缩短电泳时间，降低电压，增强凝胶浓度；2，分子大小相近的DNA带不易分辨增加电泳时间，核准正确的凝胶浓度；3， DNA 变性电泳前请勿高温加热DNA链，以20mM NaCl Buffer稀释DNA；4，DNA链巨大，常规凝胶电泳不合适 在脉冲凝胶电泳上分析

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核酸电泳凝胶的染色

核酸电泳凝胶的染色

凝胶的染色和观察 凝胶中核酸带的染色，常用溴化乙锭法和银染法。前者与琼脂糖凝胶的染色方法相同。

银染法的灵敏度较高，可如下操作:

(1) 将凝胶置固定液(10%乙醇，0.5%冰醋酸)中固定10分钟;

(2) 双蒸水洗1-2次;

(3) 置0.01mol/L AgNO3溶液中，室温反应15-30分钟;

(4) 充分水洗;

(5) 置NaOH-甲醛混合液(200ml 3%NaOH，含1ml甲醛)中反应至条带显色清晰，本底适宜;

(6) 用5%冰醋酸终止反应。

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LF—CZ05A/B/C型 高通量垂直电泳槽

北京龙方科技为您提供信息如下，希望能对您有所帮助！  龙方电泳  伴您成功！

产品特点：

正负电极的铂金丝直径均为0.26mm，纯度为99.95%，

结实耐用，电场稳定。

双板一次可跑204个电泳样品，大大提升了实验效率。

凝胶玻璃板与边长一体化设计，让操作更简单。

可同时运行2块300×105mm的电泳凝胶。

技术参数：

电泳槽正负电极的铂金丝直径均为0.26mm，

纯度为99.95%。

凝胶面积：300×105mm。

凝胶标准厚度：1mm。

样品梳标准齿数：102齿（可以选配64齿）。

样品梳标准厚度：1mm。