活体脑化学物质实时分析系统在线电化学分析方法

Mao等将0s-gel-HRP和次氧化酶同时固定在电极上,建立了检测次的在线电化学分析方法,将检测电压置于-200 mV ,避免了抗坏血酸等物质的干扰,也提高了检测的灵敏度。此外,他们将利用氧化酶构建在线分析方法的传统思路拓展,提出利用其它分子作为HRP电子传递媒介体发展在线分析方法的新策略IS8],通过在电极表面电聚合麦尔多拉蓝(Meldola 'sblue,MB),实现了HRP与电极之间的界面电子转移,建立了葡萄糖和测定的在线电化学分析方法。

活体脑化学物质实时分析系统基于脱氢酶电化学生物传感器的分析

基于脱氢酶电化学生物传感器的分析：

与氧化酶型生物传感器相比,脱氢酶型生物传感器不依赖于O,且能够在较低的氧化电位下工作，因此应具有良好的抗干扰能力。由于大部分脱氢酶自身并不包含辅酶因子,该类电化学生物传感器常需外加辅酶因子(如NAD') , 协助完成酶对底物的催化。但是.辅酶的还原态(NADH)电化学氧化速率较率。

活体脑化学物质实时分析系统多酶协同电化学生物传感器的分析

神经系统中存在着一类重要化学物质,如乙酰[)、ATP1%'1 ,y-氨基丁酸R等,既没有电化学活性,也缺少相对应的氧化酶或脱氢酶识别元件,利用一般的电化学生物传感原理很难实现其直接检测。因此,多酶串联反应的电化学生物传感器应运而生。如乙酰的传感分析可同时利用乙酰酯酶(Acetylcholine oxidase，AChE)和氧化酶(Choline，ChOx ) ,通过检测酶促反应过程中H,0。的生成量实现乙酰的传感分析。但是,在神经系统中,除抗坏血酸、尿酸等具有电化学活性的物质外，细胞间液中的浓度比乙酰的浓度一般高1000倍左右,这些物质都会干扰乙酰的测定。因此,消除和抗坏血酸的干扰是乙酰分析的关键。Niwa等!R]在微透析取样-在线电化学检测系统研制的过程中,在乙酰电化学传感器的上游引入固定有氧化酶和过氧化氢酶( Catalase )的微柱,先将及其氧化产生的H,0,消耗掉,从而避免对乙酰的干扰。为了降低抗坏血酸的干扰,他们在AChE-ChOx/Os-gel-HRP修饰层上修饰了Nafion 膜,阻止带负电荷的抗坏血酸向电极表面扩散。基于此,他们建立了乙酰的高选择在线电化学分析方法,在大鼠海马脑切片上,成功检测到电刺激诱导的胞外乙酰浓度的升高。

活体脑化学物质实时分析系统实时压力导入法

实时压力导入法(Real-time pressure method，RTP)[34.3839]与RTI类似,但探针是在压力的作用下导入到脑组织的,所以该方法因能导入带电分子和中性分子而具有更广泛的适用性。RTP同样使用外径为3 ~6 um 的玻璃毛细管,且仅充满溶液。值得注意的是,在具体操作时,必须小心清除溶液中的所有气泡,因为给予压力脉冲时,气泡会阻止溶液从毛细管中出来。