冻存袋,可千万别这么用哈!
1.不要使用金属管夹
2.不要离心
3.不要在冻存袋上直接写字标识冻存细胞的信息
4.不要在冻存袋表面粘帖标签不推荐使用同一冻存袋多次冻融细胞
5.DMSO稀释以后才能放进冻存袋,DMSO浓度不要超过10%
6.复苏细胞时建议把冻存袋放在一个保护袋中进行融化
7.不要超过冻存袋推荐的工作体积
使用冻存袋的注意事项
1、使用冻存袋储存样本时,严格要求应把冻存袋放入液氮的气相层或冰箱中保存!如果冻存袋储存于液氮液体中,液氮有一定几率会渗入冻存袋内部,复苏时液氮气化导致管内外压力不平衡,这样极易造成冻存管的炸裂,并具有生物危害性。
2、冻存的样本量不要超过冻存袋要求的大工作体积。
3、用毕暂时不再使用时,应洗净并擦净活栓,在活栓处应垫一纸条,以防粘连。
细胞冻存离心问题
目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除 DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了会受压过大, 。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液 体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无有异常。
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