不同培养基的体积对抑菌圈的抑菌圈测定仪

（1）接种液准备：按照标准规定，用PBS缓冲液稀释细菌悬液至1×106cfu/mL～5×106cfu/mL。

（2）培养基准备：分别用移液制备10 mL、15mL、20 mL、25 mL四个不同体积的培养基各6个（3个用于ATCC6538金黄色，另3个用于8099大肠）。

（3）试样接种：用无菌棉拭子蘸取接种菌液，在平皿的培养基表面均匀涂抹3次，每涂抹1次，平皿转动60°，后将棉拭子绕平皿边缘涂抹一周，盖上盖子，置室温干燥5 min。

（4）贴试样：将试样平贴在培养基上，用无菌镊子轻压试样，使其紧贴培养基表面。每个培养基贴一块试样于中间位置。

（5）培养：倒置平皿，放入生化培养箱中37℃培养16h～18 h。

（6）测量：测出每个平皿中的抑菌圈外沿总宽度及试样总宽度，进而算出抑菌圈宽度，求出平均值。

从试验结果可看出，不同体积的培养基对抑菌圈的影响还是比较大的。培养基体积为10 mL和15 mL时，抑菌圈相差不大，但当培养基增加到20 mL时，抑菌圈骤降，下降率超过20%。总体来说，随着培养基体积的增加，厚度也，但抑菌圈却反而变小。原因可能是体积增大，越多的剂渗透到了培养基底层，从而影响了表面的抑菌圈大小。

抑菌圈测定仪方法

管碟法：在含菌培养基平面上放置一定大小的不锈钢圈，在其中滴加药液，通过药剂水平扩散形成大小不同的抑菌圈来比较药剂毒力。目前上将此法定为的标准方法。此外还用于素类药剂的筛选、定性定量分析和在动植物体内残留量的测定方面。

滴下法：利用、毛细管等器具，将药液直接滴加在含菌培养基平面上，培养一定时间后，根据抑菌圈大小不同来比较药剂毒力的方法

抑菌圈分析仪的使用装置技巧

抑菌圈分析仪自动分割相互成片粘连的长形、圆形等菌落目标，用户可选择分割或不分割。还可手动分割、合并菌落目标图像，具有快速水平集提取技术，可按20类分类识别计数特定颜色、形状的菌落数量，并可类别转换修正。可同时选择6个目标区自动分别分析，并自由增减或编辑分析目标区。

抑菌圈分析仪全新的数码电路设计，智能识别图像，操作简便快捷，采用扫描仪采取图像。比摄像机方式采取图像精度高的多，适应全部各类，可以测量摄像机式仪器不能测量的。抑菌圈分析仪采用冷阴极低压荧光管作为光源，无灯丝，发光度高，色纯度高，可以完成药典一、二、三剂量及合并计算和全部的效价测量。

抑菌圈测定仪微生物检定法

应记录检定菌的名称，培养基的编号、批号及其pH值，灭菌缓冲液的名称及pH值，标准品的来源、批号及其纯度或效价，供试品及标准品的称量（平行试验2份），溶解及稀释步骤和核对人，高低剂量的设定，抑菌圈测量数据（当用游标卡尺测量直径时，应将测得的数据以框图方式顺双碟数记录；当用抑菌圈测量仪测量面积或直径时，应记录测量仪器的名称及型号，并将打印数据贴附于记录上），计算式与结果，可靠性测验与可信限率的计算。