ELISA试剂盒——ELISA实验通用规则
1、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
ELISA试剂盒——会出现的问题及解决办法
阴性标准品的吸光值低于阳性标准品的吸光值。
a.原因:微孔中的试剂未能充分混合。
解决办法: 试剂加完后,需轻敲盘四周使其充分混合均匀。
b.原因:洗板过程发生问题。
解决办法:请随时监控洗板过程,洗完后立即进行下一步骤。
c.原因:添加样品或酶标记物的量不一致。
解决办法:请使用已校正过的移液***,并确保其与吸头之间有高度密合性。
Elisa试剂盒有哪些需要注意的?
1. 跟着病况的进展或由其他因素影响,某些在机体内的含量发作大幅动摇,因此有必要对标本进行预处理。间接法测定中,标本恰当稀释还可下降非特异性反响。
2. 加样一般运用加液器,在ELISA试剂盒中一般有4次加样:加标本、加酶结合物、加底物和加间断液。加标本时有必要每份标本运用一支移液器吸嘴,避免交叉污染。加酶结合物、底物和间断液时则不需更换吸嘴。
3.在成批手艺检测中,还应留神操作时差的影响。加样及混匀时间的差异,使抗原反响和酶促反响时间不一致,对竞争法及定量检测影响很大,不留神可能会导致过错效果或定量不准。
Elisa试剂盒操作注意事项
1.Elisa试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排***加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按污染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
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