光度计典型故障
1、仪器不能调零。可能原因:
a.光门不能完全关闭。解决方法:修复光门部件,使其完全关闭。
b.透过率“100%”旋到底了。解决方法:重新调整“100%”旋钮。
c.仪器严重受潮。解决方法:可打开光电管暗盒,用电吹风吹上一会儿使其干燥,并更换干燥剂。
d.电路故障。解决方法:检修电路。
2、仪器不能调“100%”。可能原因:
a.光能量不够。解决方法:增加灵敏度倍率档位,或更换光源灯(尽管灯还亮)。
b.比色皿架未落位。解决方法:调整比色皿架使其落位。
c.光电转换部分老化。解决方法:更换部件。
d.电路故障。解决方法:调修电路。
3、测量过程中,“100%”点经常变动。可能原因:
a.比色皿在比色皿架中放置的位置不一致,或其表面有液滴。解决方法:用擦镜纸擦干净比色皿表面,然后将其安放在比色槽的左边,上面用定位夹定位。
b.电路故障(电压、光电接收、放大电路)。解决方法:送修。
4、数显不稳。可能原因:
a.预热时间不够。解决方法:延长预热时间至30分钟左右(部分仪器由于老化等原因,长时间处于工作状态时,也会工作不稳)。
b.光电管内的干燥剂失效,使微电流放大器受潮。解决方法:烘烤电路,并更换或烘烤干燥剂。
c.环境振动过大、光源附近空气流速大、外界强光照射等。解决方法:改善工作环境。
d.光电管、电路等其它原因。
分光光度计的应用
分光光度计的通常用途之一是测量细胞密度。细胞密度测量可用于产生细菌的对数生长曲线,从中可以确定重组蛋白整合的佳时间。
分光光度计还可用于测量化学反应速率。在该实施例中,吸光度用于监测酶促反应,通过452nm的中间反应随时间消失。可以通过将数据与适当的等式匹配来计算该酶促步骤的速率。
微量分光光度计的引入消除了对样品架的需求。这些分光光度计使用表面张力来保持样品。
微量分光光度计是测量昂贵的小体积样品(如生物分子,包括蛋白质和核酸)的质量和浓度的佳选择。
蛋白质在280nm处的吸光度取决于在色氨酸,酪氨酸和苯丙氨酸中发现的芳族侧链的含量,以及两个半胱氨酸之间存在的二硫键。
蛋白质的浓度可以由其在280nm处的吸光度和其吸收系数确定,该吸收系数基于氨基酸的组成。
DNA和RNA在260nm处具有大吸光度,从中可以确定它们的浓度。还可以从吸光度读数与特定波长的比率来评估核酸的纯度。
红外分光光度计
一般的红外光谱是指大于760nm的红外光谱,这是研究有机化合物常用的光谱区域,能分析各种状态(气、液、固)的试样,红外光谱法的特点是:快速、样品量少(几微克~几毫克),特征性强(各种物质有其特定的红外光谱图)、能分析各种状态(气、液、固)的试样以及不破坏样品。
荧光分光光度计
荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器,应用于科研、化工、、生化、环保以及临床检验、食品检验、教学实验等领域,通过对这些参数的测定, 不但可以做一般的定量分析, 而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化,从而阐明分子结构与功能之间的关系。
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