低倍镜、高倍镜的使用方法

偏光显微镜的使用方法

一）低倍镜、高倍镜的使用练习

1. 观察文字或字母装片：取一片字母装片，用低倍镜观察，反复练习对光、调光、标本放置和调节焦距等。如将玻片前后左右移动时，注意物像与玻片移动方向是否一致，玻片上的字母是正像还是反像，为什么?

2. 观察羊（或头发）交叉装片：取一张毛（发）交叉装片，先用低倍镜观察，找到两根毛（发）后，再将毛（发）交叉点移到视野中央，然后换高倍镜观察，再轻微转动细调节器，观察不同层次，判定哪条毛（发）在上方，哪条位于下方。

（二）油镜的使用练习

1. 取一张血涂片或取血一小滴，滴于清洁的载玻片一端，另取一张边缘平整的载玻片，做成血涂片。先用低倍镜再用高倍镜进行观察。

2. 用油镜观察，并分辨红细胞、白细胞和淋巴细胞，比较三种物镜的放大倍数和分辨率。

3. 观察兔脊神经节切片（示固定染色的细胞）

取兔脊神经节切片标本先在调好光线的低倍镜下观察（固定染色的标本需调较亮光线），低倍镜下找到要观察的标本，为淡紫色的神经节切面，在其外围包有被膜，且向内伸入，形成神经节的结缔组织支架，节内有许多大小不等的神经细胞，呈散在分布。然后转换高倍镜，选择完整而清晰的圆形

神经细胞仔细观察其内部结构。可见到在细胞中央有一圆形核，核内有着色为深紫红色的圆形核仁及染色质颗粒，核与细胞膜之间是均匀浅紫色的细胞质，在细胞的外面围有若干个被囊细胞，它起保护神经细胞的作用。在神经细胞之间还可看到有轴索横断面和许多神经纤维，多呈交错排列。

4. 观察完毕，务必将油镜按正确方法擦净。

偏光显微镜物镜的鉴别率

物镜的鉴别率是指物镜具有将两个物点清晰分辨的能力，以两个物点能清晰分辨的距离d的倒数表示。d愈小，表示物镜的鉴别率愈高。

要明白鉴别率可以有一定的限度，这就要用光通过透镜后产生衍射现象来解释。物体通过光学仪器成象时，每一物点对应有一象点，但由于光的衍射，物点的象不再是一个几何点，而是有一定大小的衍射亮斑。靠近的两个物点所成的象一两个亮斑如果互相重叠，则导致这两个物点分辨不清，从而限制了光学系统的分辨本领一分辨率。显然，象面上衍射图象中央亮斑半径愈大，系统的分辨本领愈小。

瑞利（Rayleigh）提出一个推测（又称瑞利准则）：认为当A1′衍射花样的值正好落在A2′衍射花样的极大值时，A1、A2是可以分辨的，将此时定出的两物点距离A1、A2作为光学统的分辨极限。θ0称为极限分辨角。不言而喻，当θ＞θ0时是完全可分辨的，θ＜θ0时是不可分辨的。

由圆孔衍射理论得到：θ0=1.22λ / D

式中λ──入射光波长；

D──入射光的允许孔径（透镜直径）。

因为θ0很小，所以由图2-4得：

d′≈θ0=1.22λS / D

物镜在设计时，总是使它满足阿贝正弦条件的，即

ndsinu=n′d′sinu′

式中n和n′为物、象所在空间的折射率，成象总是在空气介质中，故n′=1；u各u′分别为光线在物、象空间共轭点上的孔径角；d和d′分别为物点、象点中心斑的间距。

考虑到显微镜中入射光并非都是平行光，有倾斜光线，对上式系数作适当的修正，所以式中nsinu就是物镜的数值孔径，因此，上式或者写：d=0.5λ/N.A

因此表明：物镜的数值孔径愈大，入射光的波长愈短，则物镜的分辨能力愈高。在可见光中，观察时常用黄绿光（λ ≈4400A），则可使分辨能力提高25%左右

偏光显微镜的使用及注意方法

偏光显微镜偏光镜的校正

（1）确定下偏光镜（起偏振镜）的振动方向：将上偏光镜（检偏振镜）自镜中推出，只用下偏光镜观察工作台上。转动工作台，当黑云母解理缝与下偏光镜的振动方向平行时对黑云母吸收性强，此时呈现深棕色；当解理缝与起偏振镜的振动方向垂直时，黑云母吸收性微弱，此时晶体呈现淡黄色，据此就能确定起偏振镜的振动方向。

（2）调整下偏光镜的振动方向与目镜分划板十字线横丝平行：将黑云母解理缝与目镜分划板十字线横丝平行，转动下偏光镜至黑云母呈现深棕色位置，此时下偏光镜的振动方向平行横丝，其刻线应对准0°或180°。

（3）确定上偏光镜（检偏振镜）与下偏光镜（起偏振镜）的振动方向正交：将黑云母切片取出，推入上偏光镜，如果视域呈黑暗，则上、下偏光镜振动方向正交；否则转动上偏光镜直至视域黑暗。

显微镜的维护_新闻中心

显微镜的维护

1.必须熟练掌握并严格执行使用规程。

　　2.取送显微镜时一定要一手握住镜臂，另一手托住底座。显微镜不能倾斜，以免目镜从镜筒上端滑出。取送显微镜时要轻拿轻放。

　　3.观察时，不能随便移动显微镜的位置。

　　4.凡是显微镜的光学部分，只能用特殊的擦镜头纸擦拭，不能乱用他物擦拭，更不能用手指触摸透镜，以免汗液玷污透镜。

　　5.保持显微镜的清洁，避免灰尘、水及化学试剂的玷污。

　　6.转换物镜镜头时，不要搬动物镜镜头，应转动转换器。

　　7.切勿随意转动粗准焦螺旋。使用细准焦螺旋时，用力要轻，转动要慢，转不动时不要硬转。

　　8.不得任意拆卸显微镜上的零件，严禁随意拆卸物镜镜头，以免损伤转换器螺口，或螺口松动后使低高倍物镜转换时不齐焦。

　　9.在使用高倍物镜时，不要用粗准焦螺旋调节焦距，以免移动距离过大，损伤物镜和玻片。

　　10.保持显微镜的干燥。

　　11.用毕后，必须检查物镜镜头上是否沾有水或试剂，如有则要擦拭干净，并且要把载物台擦拭干净，按规定放好。